Sephadex LH-20 装填指南 Sephadex LH－20 是由葡聚糖G-25 羟丙基化工而成，属于分子筛凝胶，尤其适用于天然产物在有机溶剂中的纯化。例如：类固醇、萜类、脂类以及小分子多肽等，Sephadex LH－20同时适用于分子类别非常相似的物质的分离和工业规模的制备，即可用于初步纯化步骤，也可用与最终精制步骤，如非对映同分异构体的分离。 制备凝胶悬浮液 装填的重要原则之一就是需要形成一个稳定均一的柱床。胶颗粒越均一（粒径分布越窄），越容易获得稳定均一的柱床。但是对于Sephadex LH－20 而言，25～100μm 的粒径范围相对于许多用于制备色谱的填料而言，不能说分布均一，也就是说其粒径分布较宽。然而当胶溶胀后就相对容易得到均一的柱床。这对于长柱（最高至250cm）而言也是同样的。在装柱前，层析柱和储槽都必须进行彻底清洗。 Sephadex LH－20 在使用之前必须进行溶胀。在溶胀的过程中，要尽量避 免 过分搅 拌 ，否 则会 破 坏 球 形胶粒，且 要避 免 使用磁 力 搅 拌 器 。 1． 在室 温 下 ，将 凝胶溶胀于层析溶剂中至少 三 小时，溶胀后胶体积 的大 小决 定于所 使用的溶剂系 统 ，请 参 考 后页 之胶溶胀表 计 算 特 定柱体积 所 需要干 胶的量。 2． 使溶胀的胶体积 沉 淀 之后占 总 体积 的75％ ，上 层溶剂占 25％ ，这时，悬浮液从 一个容器 倒 入 另 一个容器 时胶粒可移 动 。 3． 将 溶胀后的凝胶根 据 装柱要求 均匀 倒 入 柱内 ，在保 证 胶粒不变 形的前提 下 ，应 在尽可能高的压 力 下 装柱，反 压 不要超 过1.5ba。 表 一 干 胶溶胀表 溶 剂 床体积 （mL 凝胶/g 干 胶粉 末 ） Dinethyl sulphoxide 二 甲 亚 砜 4.4～4.6 Pyridine 嘧 啶 4.2～4.4 Water 水 4.0～4.4 Dimethylformamide 二 甲 基甲 酰 胺 3.8～4.2 Saline 生 理 盐 水 3.9～4.1 Methanol 甲 醇 3.8～4.1 Methane dichloride 二 氯 乙 烷 3.8～4.1 Chloroform1 氯 仿 3.8～4.1 Propanol 丙醇 3.7～4.0 Ethanol2 乙 醇 3.6～3.9 Isobutanol 异丁 醇 3.6～3.9 Formamide 甲 酰 胺 3.6～3.9 Methylene dichloride 二 氯 甲 烷 3.6～3.9 Butanol 丁 醇 3.5～3.8 Isopropanol 异丙醇 3.3～3.6 Tetrahydrofuran 四 氢 呋 喃 3.3～3.6 Dioxane 二 氧 杂 环 ...
