高中生物基因工程知识点小结基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术。操作水平：DNA 分子水平原理：基因重组优点：1.突破物种界限 2.定向改造生物的遗传特性（一）基因工程的基本工具1. “分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点切割，因此具有专一性。（3）作用的化学键：切割磷酸二酯键（4）结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2. “分子缝合针”——DNA 连接酶（1）作用：将两个具有相同粘性末端的 DNA 片段连接起来，形成重组 DNA（2）连接的化学键：磷酸二酯键（3）与 DNA 聚合酶作用的异同：DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端，形成磷酸二酯键。D 皿连接酶DNA 聚合酶不同点-连接的 D 恥单链模板'不要模板要模板连接的对象2 个 DKA 片段单个脱氧核昔酸透加到已存在柯单琏片段上相同点作用实质形成磷酸—酯键.化学本质3. “分子运输车”一一运载体（1）载体具备的条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保存。② 具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。③ 具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。④ 对受体细胞无害。（2）最常用的载体是质粒,它是一种环状 DNA 分子。（3）其它载体：噬菌体、动植物病毒（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.从基因文库中获取（不知道目的基因的核苷酸序列的情况下采用）2.人工合成。常用方法有：（1）反转录法（已经获得 mRNA 的情况下采用）（2）化学合成法（知道目的基因的核苷酸序列、基因比较小的情况下采用）3. PCR 技术扩增目的基因(知道目的基因两端的核苷酸序列、基因比较大的情况下采用)(1) PCR 的含义：是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。(2) 目的：获取大量的目的基因(3) 原理：DNA 双链复制(4) 过程：第一步：变性，加热至 90〜95°CDNA 解链为单链；(高温解旋)第二步：复性，冷却到 55〜60C，引物与两条单链 DNA 结合；第三步：延伸，加热至 70〜75C，热稳定 DNA 聚合酶...
