生化试验六-酶基本性质

1 / 10 课程名称：生物化学实验指导老师：史影成绩：实验名称：酶的基本性质实验——底物专一性、激活剂和抑制剂、最适温度同组学生姓名：陈莞尔，潘盛警Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的1.了解酶的专一性。2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。3.学会排除干扰因素，设计酶学实验。二、基本原理酶是具有高度专一性的有催化功能的蛋白质。酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶促反应要比无机催化反应快数十倍。酶催化的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对一种或一类底物其催化作用，对其他底物无催化反应。根据各种酶对底物的选择程度不同，可分成下列几种：1.相对专一性。一种酶能催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。3.立体异构专一性：有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。用Benedict 试剂检测反应产物。Benedict 试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化铜沉淀。Na2CO 3+ 2H 2O 2NaOH + H 2CO3CuSO4+ 2NaOH Cu(OH) 2+ Na2SO4专业： ____生物工程姓名： _____陈传鑫学号： ___3090104963日期： ____2011.3.22_ 地点： _生物实验楼306实验报告2 / 10 还原糖 (— CHO or — C=O)+ 2Cu(OH) 2Cu2O + 2H 2O + 糖的氧化产物（黄色或砖红色）淀粉和蔗糖无半缩醛基，无还原性，与Benedict 试剂无显色反应。淀粉被淀粉酶水解后产生葡萄糖， 蔗糖被蔗糖酶水解后产生果糖和葡萄糖，产物都是还原糖， 因此能被 Benedict试剂氧化生成砖红色的Cu2O 沉淀。三、实验材料与试剂1、实验材料⑴ 蔗糖酶 (样品Ⅳ）；⑵ 新鲜唾液（含唾液淀粉酶）；2、实验试剂⑴ 蔗糖酶液蔗糖酶液 (样品Ⅳ）加蒸馏水适当稀释，备用；⑵ 唾液淀粉酶液（学生自制）取 0.5mL 唾液至 25ml 量筒中，用蒸馏水（稀释）到25ml，用棉花过滤备用。唾液稀倍数因人而异，可稀释50～400 倍，甚至更高；⑶ 5%蔗糖（ A.R.）溶液；...