链霉素在牛奶中残留的微生物学检测方法样本VIP专享

下载后可任意编辑 3940 张升 链霉素在牛奶中残留的微生物学检测方法 -04-27 15:16:18| 分类: 食品 08 级 1-4 班 | 标签: |字号大中小 订阅 [摘要] 目的: 建立链霉素在牛奶中残留的微生物学检测方法。 方法: 采纳微生物测定法定量检测牛奶中链霉素残留量, 样品前处理用 10%( m/v) 三氯乙酸作为提取液, 采纳冷冻离心, 使牛奶中残留链霉素得到提取和分离。 结果: 链霉素在 0.10~3. 20u/mL 的浓度范围内具有良好线性关系( r=0.9981) ,牛奶中 3 种添加浓度 0.20、 0.80、 1.60 u/g 的平均回收率为 97.6%( n=9) , 3 种添加浓度 0.20、 0.80、 1.60u/g 各自的 RSD 为: 1.6 %, 3.7 %, 1.2 %( n=3) 。 结论: 本方法可用于牛奶中链霉素残留的检测。[关键词] 链霉素; 牛奶; 微生物学检测; 三氯乙酸; 冷冻离心 链霉素属于氨基糖苷类抗生素, 用于革兰氏阴性菌和结核杆菌感染, 在治疗家畜感染性疾病中发挥了重要作用, 但抗生素的耐药性日益增强, 而且毒副作用比较大[1]。为了加强兽药残留管理工作, 保证畜产品质量安全, 农业部于 1999 年发布了《动物性食品中兽药最高残留限量》的通知, 并规定牛奶中链霉素的最高残留限量( MRL) 为 200 ug/kg。然而, 相应的链霉素检测技术并不完备, 由于氨基糖苷抗生素缺少发色基团, 应用到 HPLC 时常要对其衍生化, 设备条件过高, 难以普及; 而且其理化测定方法相当复杂和通用性差[2]。本文采纳被测样品经 10%( m/v) 三氯乙酸提取液震荡、 浸泡, 冷冻离心, 沉淀, 将样品中的链霉素提取于上清液中, 再以枯草芽孢杆菌为检定菌, 用微生物检定一剂量法测定链霉素的残留量。1 材料和设备1.1 试药 链霉素标准品( 中国药品生物制品鉴定所 批号: 0308- 12 含量: 731u/mg) , 其余均为分析纯。下载后可任意编辑1.2 试剂 10%( m/v) 三氯乙酸, 25%( m/v) NaOH , 0.2mol/L NaOH, 0.1mol/L 磷酸, 磷酸盐缓冲液( PH7.8) , 链霉素标准品贮备液( 精密称取适量标准品, 用磷酸盐缓冲液( PH7.8) 溶解, 配成1000u/mL 浓度的溶液) 。1.3 培育基 营养琼脂培育基( PH7.2) ( 《中国兽药典》二 0 版 附录 68 页) , 抗生素检定培育基 II( PH8.0) ( 《中国兽药典》二 0 版 附录 68 页) 。1.4 试验菌种 枯草芽孢杆菌( BaciLLus SubtiLis,CMCC 63501) 。1.5 牛津杯 不锈钢管( 外径( 7.8...