质控菌种管理规定微生物实验用菌种是进行新产品研发和生产质量控制的标准物质。为了保证微生物实验的准确灵敏和人员及环境的卫生安全,特制定以下规定:1. 菌种采集。实验室用菌种一是到国家法定机构采购,二是购买ATCC 菌种,三是科研中菌种交流。 不管是哪种来源, 均由公司统一采集。采集中严格按照规范执行。要求包装可靠,采集迅速,不泄漏不污染。保证菌种合格和环境安全。采集中要有菌种传代标识。2.菌种的活化:购买的标准菌种必须要求是冻干粉,科研中菌种交流可以为斜面或液体。菌种的首次活化最好是在非选择性琼脂培养基上,除非特殊情况或特别推荐,一般不用液体培养基。具体使用培养基的情况如下表,详细菌种使用方法见附表:方 法培养基方法 1 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) ,非选择性羊血琼脂,PCA 或营养琼脂, 35 ℃正常环境培养 24-48 小时。方法 2 非选择性羊血琼脂,35℃正常环境培养24-48 小时。方法 3 巧克力琼脂平板,35℃5-10%CO2环境培养 24-48 小时。方法 4 CDC 厌氧血琼脂35℃厌氧培养48-72 小时;部分专性厌氧菌能需要5-7 天,才能充分生长;对于梭菌,以下新鲜培养基也可选用:营养琼脂,TSA 琼脂, PCA 琼脂,需培养 48-96 小时。方法 5 沙堡氏葡萄糖Emmons 琼脂 25-28 ℃培养 3-7 天;也可用PDA 琼脂。方法 6 巧克力琼脂平板,35℃微需氧环境培养48-72 小时。方法 7 改良罗氏琼脂或Middlebrook琼脂, 35 ℃5-10%CO2或正常环境培养7 天。方法 8 缓冲活性碳酵母提取物琼脂,35℃正常环境培养3-5 天。方法 9 巧克力琼脂平板,35℃5-10%CO2环境培养 48 小时。方法 10 先用脑心浸出液肉汤或TSB 培养基 35 ℃增菌培养18-24 小时,再划线至TSA 琼脂 35℃正常环境培养24-48 小时。方法 11 先接种于MRS 肉汤 35℃增菌培养24-48 小时,再划线接种至含羊血的哥伦比亚 CNA 培养基 35 ℃5%CO2 环境培养 24-48 小时。方法 12 PDA 琼脂 45 ℃正常环境培养48-72 小时。方法 13 先接种于10B 精氨酸肉汤, 作系列梯度稀释35 ℃正常培养至培养基变成粉红色,接入 A-8 琼脂。 3.菌种保存。所有菌种均由实验室专人(双人双锁 )保存于专用冰箱或其它保存方式。要建立菌种登记台帐,详细记录菌种采集、保管、制备、使用、处置情况;每一种菌种一定要有本公司的检测鉴定报告(具体的的鉴定方法见ATCC提供的菌种证书方法);具体菌种保存方法如下:3.1 ...