质控菌种管理规定微生物实验用菌种是进行新产品研发和生产质量控制的标准物质
为了保证微生物实验的准确灵敏和人员及环境的卫生安全,特制定以下规定:1
实验室用菌种一是到国家法定机构采购,二是购买ATCC 菌种,三是科研中菌种交流
不管是哪种来源, 均由公司统一采集
采集中严格按照规范执行
要求包装可靠,采集迅速,不泄漏不污染
保证菌种合格和环境安全
采集中要有菌种传代标识
菌种的活化:购买的标准菌种必须要求是冻干粉,科研中菌种交流可以为斜面或液体
菌种的首次活化最好是在非选择性琼脂培养基上,除非特殊情况或特别推荐,一般不用液体培养基
具体使用培养基的情况如下表,详细菌种使用方法见附表:方 法培养基方法 1 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) ,非选择性羊血琼脂,PCA 或营养琼脂, 35 ℃正常环境培养 24-48 小时
方法 2 非选择性羊血琼脂,35℃正常环境培养24-48 小时
方法 3 巧克力琼脂平板,35℃5-10%CO2环境培养 24-48 小时
方法 4 CDC 厌氧血琼脂35℃厌氧培养48-72 小时;部分专性厌氧菌能需要5-7 天,才能充分生长;对于梭菌,以下新鲜培养基也可选用:营养琼脂,TSA 琼脂, PCA 琼脂,需培养 48-96 小时
方法 5 沙堡氏葡萄糖Emmons 琼脂 25-28 ℃培养 3-7 天;也可用PDA 琼脂
方法 6 巧克力琼脂平板,35℃微需氧环境培养48-72 小时
方法 7 改良罗氏琼脂或Middlebrook琼脂, 35 ℃5-10%CO2或正常环境培养7 天
方法 8 缓冲活性碳酵母提取物琼脂,35℃正常环境培养3-5 天
方法 9 巧克力琼脂平板,35℃5-10%CO2环境培养 48 小时
方法 10 先用脑心浸出液肉汤或TSB 培养基 35 ℃增菌培养18-24 小时,再划线至TSA 琼脂 35℃正常环境培养