电脑桌面
添加小米粒文库到电脑桌面
安装后可以在桌面快捷访问

DNA的溶解度问题

DNA的溶解度问题_第1页
1/21
DNA的溶解度问题_第2页
2/21
DNA的溶解度问题_第3页
3/21
乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或RNA)准备。 其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使核酸沉淀出的解决方案。 然后可以休息的解决方案,通过离心分离沉淀核酸。 在寒冷的70%乙醇洗涤沉淀,然后再经过离心步骤乙醇被删除,并允许核酸颗粒干燥,然后在干净的缓冲溶液中悬浮。 那么如何工作的呢? 关于溶解度的位... 首先,我们需要知道为什么核酸是易溶于水。 水是极性分子 - 它有一个部分负电荷的氧原子附近,由于共用电子对,部分正电荷的氢原子(见右图)附近。 极性分子,如 DNA 或RNA,因为这些费用,可以与水分子的静电相互作用,使他们能够很容易溶解于水。 极性分子,因此可以被描述为亲水性和非极性分子,不能轻易与水分子相互作用,疏水。 核酸是亲水性由于带负电荷的磷(PO3-)组沿糖磷酸骨架。 盐的作用... 好吧,这样的协议。 盐在协议中的作用是消除糖磷酸骨架上的收费。 一种常用的盐是醋酸钠。 在溶液中,分解成 Na +和[醋酸 - 醋酸钠。 带正电的钠离子中和负电荷的核酸PO3组,分子远低于亲水性,因此多不溶于水。 乙醇的作用... 钠离子在溶液中和 PO3-离子之间的静电吸引力, 库仑定律 ,这是解决方案的电介质常数的影响决定。 水具有较高的介电常数,这使得它相当困难 Na +和 PO3-走到一起。 另一方面乙醇低得多的介电常数,使得它的Na +更容易互动,PO3-,它的电荷屏蔽,使核酸的亲水性,使其下降了解决方案。 温度的作用... 作为必要的协议,在协议中普遍提及的核酸/盐/乙醇的混合物在低温(如-20 或-80C)的孵化。 然而,根据,曼尼阿蒂斯等 (分子克隆实验手册第二版...第二版- ?!我需要得到一个新的版本),这是不是必需的,因为 20ng/mL 低浓度核酸沉淀在0-4C,所以在冰上潜伏期为 15-30 分钟就足够了。 用7 0 %乙醇洗涤步骤... 这一步是洗任何剩余的盐颗粒的DNA。 核酸沉淀的一些技巧...  盐的选择  使 用 常 规 的 DNA 沉 淀 醋 酸 钠 ( 0.3M 终 浓 度 , pH 值 5.2)  使 用 DNA 含 有 SDS 自 氯 化 钠 保 持 SDS 在 70% 乙 醇 中 易 溶 ,所 以 它 不 会 沉淀 的 DNA 样 本 , 氯 化 钠 ( 0,2 米 决 赛 浓 度 ) 。  使 用 氯 化 锂 ( 0.8M 终 浓 度 ) 的 RNA。 这 是 因 为 2.5-3 乙 醇 卷 应 该 被 用 于RNA 沉...

1、当您付费下载文档后,您只拥有了使用权限,并不意味着购买了版权,文档只能用于自身使用,不得用于其他商业用途(如 [转卖]进行直接盈利或[编辑后售卖]进行间接盈利)。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。
3、如文档内容存在违规,或者侵犯商业秘密、侵犯著作权等,请点击“违规举报”。

碎片内容

DNA的溶解度问题

确认删除?
VIP
微信客服
  • 扫码咨询
会员Q群
  • 会员专属群点击这里加入QQ群
客服邮箱
回到顶部