DNA的溶解度问题

乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸（DNA 或RNA）准备。 其基本做法是，加入盐和乙醇水溶液，这迫使核酸沉淀出的解决方案。 然后可以休息的解决方案，通过离心分离沉淀核酸。 在寒冷的70％乙醇洗涤沉淀，然后再经过离心步骤乙醇被删除，并允许核酸颗粒干燥，然后在干净的缓冲溶液中悬浮。 那么如何工作的呢？ 关于溶解度的位... 首先，我们需要知道为什么核酸是易溶于水。 水是极性分子 - 它有一个部分负电荷的氧原子附近，由于共用电子对，部分正电荷的氢原子（见右图）附近。 极性分子，如 DNA 或RNA，因为这些费用，可以与水分子的静电相互作用，使他们能够很容易溶解于水。 极性分子，因此可以被描述为亲水性和非极性分子，不能轻易与水分子相互作用，疏水。 核酸是亲水性由于带负电荷的磷（PO3-）组沿糖磷酸骨架。 盐的作用... 好吧，这样的协议。 盐在协议中的作用是消除糖磷酸骨架上的收费。 一种常用的盐是醋酸钠。 在溶液中，分解成 Na +和[醋酸 - 醋酸钠。 带正电的钠离子中和负电荷的核酸PO3组，分子远低于亲水性，因此多不溶于水。 乙醇的作用... 钠离子在溶液中和 PO3-离子之间的静电吸引力， 库仑定律 ，这是解决方案的电介质常数的影响决定。 水具有较高的介电常数，这使得它相当困难 Na +和 PO3-走到一起。 另一方面乙醇低得多的介电常数，使得它的Na +更容易互动，PO3-，它的电荷屏蔽，使核酸的亲水性，使其下降了解决方案。 温度的作用... 作为必要的协议，在协议中普遍提及的核酸/盐/乙醇的混合物在低温（如-20 或-80C）的孵化。 然而，根据，曼尼阿蒂斯等 （分子克隆实验手册第二版...第二版- ？！我需要得到一个新的版本），这是不是必需的，因为 20ng/mL 低浓度核酸沉淀在0-4C，所以在冰上潜伏期为 15-30 分钟就足够了。 用7 0 ％乙醇洗涤步骤... 这一步是洗任何剩余的盐颗粒的DNA。 核酸沉淀的一些技巧...  盐的选择  使 用 常 规 的 DNA 沉 淀 醋 酸 钠 （ 0.3M 终 浓 度 ， pH 值 5.2）  使 用 DNA 含 有 SDS 自 氯 化 钠 保 持 SDS 在 70％ 乙 醇 中 易 溶 ，所 以 它 不 会 沉淀 的 DNA 样 本 ， 氯 化 钠 （ 0,2 米 决 赛 浓 度 ） 。  使 用 氯 化 锂 （ 0.8M 终 浓 度 ） 的 RNA。 这 是 因 为 2.5-3 乙 醇 卷 应 该 被 用 于RNA 沉...