F-4600/7000 光谱校正步骤 天美科技有限公司 （安 平 编译） 1（一）激发单元（EX）仪器函数的测量 1．1 罗丹明B 的使用方法 由于激发单元分光器的波长特性等原因，必须采用罗丹明B 作为光量子计来对激发单元进行仪器的函数校正。仪器函数的读出存入自动进行，只需一次波长扫描即可。可以校正的波长范围为200～600nm。 参考图－1 将罗丹明B 的注入到三角池中。平时请将罗丹明B 保存在暗处。 图－1 罗丹明B 的加入方法 1．2 操作步骤 （1） 双击【Method】图标进入分析条件画面。 （2） 在【General】菜单中选择【Wav elength scan】波长扫描方式。 （3） 进入【Instru ment】仪器菜单。 （4） 数据模式选择【Flu orescence】荧光，光电倍增管高压设定为为400V，扫描模式选择【Ex citation 】激发光谱。 （5） 展开工具栏中【Spectrophotometer】光度计菜单，选定【Zero】,对仪器进行调零。 （6） 参考图－2 所示，将盛有罗丹明B 的三角池放入样品室的池架里，安装滤光片支架，并将红色滤光片插入其中；这时需要注意三角池和滤光片的安装方向（参考图－3）。 盛有罗丹明B 的三角池 滤光片支架 红色滤光片 图－2 安放罗丹明B 和滤光片 2 图－3 三角池和滤光片的方向 备 注：当光电倍增管电压的设置有很大的变动不久（例如：700V→250V），由于检测器的特性的原因，要想使测试数据达到稳定的状态则需要一定的时间。因此正确的调零是要等待仪器稳定后再实施。 （7）展开工具栏中的【Utility 】实用菜单中的【Instru mental Response 】仪器响应菜单，实施仪器的函数测量。图－4 是仪器函数测量的显示栏。从中选定 “ EX (200 to 600nm) ”项（参考图－4 ①）。 图－4 （8）点击【Ru n】钮（参考图－4 ② ）后，一个“请放置罗丹明 B 和红色滤光片”的信息提示栏出现，然后将盛有罗丹明 B 的三角池和红色滤光片分别放置妥当后，点击【OK】钮（参考图－5 ③ ） 图－5 3（ 9） 发 射 波 长 被 设 定 在 640nm， 激 发 波 长 (198.6-601.4nm) 扫 描 开 始 。 测 量 条 件 如 下 所 示 被 自 动 设 定 ： y Scan mode :： Ex citation （ 激 发 ） y Data mode ： Flu orescence （ 荧 光 ） y Ex slit ： 5.0 nm y Em slit ： 20.0nm y Scan speed ： 60nm/min y PTM v oltage ： 400V y...
