基因工程的基本步骤:1、提取目的基因――将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。目的基因获取方法：①鸟枪法②分子杂交法③逆转录法④人工合成法目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。2、目的基因与运载体结合用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在 DNA 连接酶的作用下连接形成重组 DNA 分子步骤：（1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有粘性末端的切口。（2）用同种限制酶切断目的基因，产生相同的粘性末端。（3）将切下的目的基因片段，插入到质粒的切口处，再加入适量的 DNA 连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒目的基因与运载体结合3、将目的基因导入受体细胞① 导入方法：借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。② 导入过程：运载体为质粒，受体细胞为细菌，一般是将细菌用 CaCl2 处理,以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。4、目的基因的检测和表达前三步的处理十分繁锁，为保证目的基因得到有效利用，通常用大量的受体细胞来接受不多的目的基因。这样，处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。目的基因导
