精品文档---下载后可任意编辑siRNA 干扰人肝癌细胞株 HepG2 生存素表达的实验讨论的开题报告1. 讨论背景人类肝脏肿瘤是全球最常见的恶性肿瘤之一，其中肝癌占据了很大的比例。早期的治疗方法包括手术切除、放射治疗和化学治疗，但这些方法并不能完全控制肝癌的生长和扩散，因此，寻找更有效的治疗方法是非常必要的。生存素是一种对细胞增殖、凋亡和生存等具有一定影响的蛋白质，其参加了细胞的功能过程。在肝癌的发生和进展中，生存素的表达水平升高，另外，其是肝癌细胞分化的基本特征之一。因此，抑制生存素的表达是一种可能的肝癌治疗方法。siRNA 是 siRNA 介导的 RNA 干扰技术的缩写，是一种基因沉默的技术，可用于抑制肝癌相关基因的表达，为讨论肝癌的治疗提供了新的讨论手段。2. 讨论目的本讨论旨在使用 siRNA 干扰技术抑制 HepG2 细胞株中生存素的表达，以探究生存素对 HepG2 的生长和增殖的影响，并为肝癌的治疗提供新的讨论思路。3. 讨论方法(1) 建立 HepG2 细胞株将 HepG2 细胞株接种在含有 10% FBS 的 DMEM 培育基中，维持在 37℃的培育箱中，每三天一次更换培育基。(2) siRNA 干扰使用 siRNA 干扰技术对 HepG2 细胞株中的生存素进行抑制。首先，根据生存素的序列设计 3 个目标 siRNA，然后将它们转化为合成siRNA，并通过转染技术将 siRNA 导入细胞中。对于转化为合成 siRNA的序列，使用西方印迹法和实时定量 PCR 等技术进行检测。(3) 细胞增殖实验采纳 MTT 实验检测细胞增殖，通过比较 HepG2 细胞株中 siRNA 干扰前后的细胞增殖情况，来评估生存素的表达对肝癌细胞增殖的影响。精品文档---下载后可任意编辑4. 预期结果本讨论估计可以证明 siRNA 干扰覆盖生存素基因可以显著抑制HepG2 细胞株的生存素表达水平，并导致肝癌细胞的增殖和生长下降。这有望为进展有效的肝癌治疗方法提供新的讨论思路。
