实验一 显微镜的使用及微生物大小测定的方法 二、基本原理 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像,它们由机械装置和光学系统两大部分组成
物镜的性能最为关键,它直接影响着显微镜的分辨率
其中油镜的放大倍数最大,对微生物学最为重要
微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一
微生物大小的测定,需要在显微镜下,借助于特殊的测量工具—测微尺,包括目镜测微尺和镜台测微尺
其中镜台测微尺并不直接用来测量细胞大小 ,而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度
目镜测微尺每小格所代表的实际长度因显微镜的不同放大倍数而异,因此用目镜测微尺测量微生物大小时,必须先用镜台测微尺进行校正,以求出该显微镜在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度,然后根据微生物细胞相当于目镜测微格数,即可计算出细胞的实际大小
两重合线间镜台测微尺格数×10 目镜测微尺每格长度= 两重合线间目镜测微尺格数 思考题 1、用油镜观察时应注意哪些问题
在载玻片和镜头之间加滴什么油
答(1)应先用摖镜纸将镜头摖干净,以防止实验的污染
使用油镜时,应先用低倍镜再用高倍镜,然后再是油镜,用完之后也要用摖镜纸将油镜摖掉
(2)滴加香柏油 (3)作用是增加折射率,即增加了显微镜的分辨率,油的折射率和分辨率成反比,同时与波长成正比
2、影响显微镜分辨率的因素有哪些
答:显微镜的分辨率指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力,最小分辨距离越小,分辨率越高,最小可分辨率距离=λ /2NA且 NA=n
sin,所以,分辨率由物镜的 NA值与照明光源的波长两个因素决定,当然还有介质的折射率
3、为什么要换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正
答:不同放大倍数,目镜测微尺每小隔所代表实际长度不一样,必须用镜台测微尺进行重新校正,这样目镜测微尺测量的长