毒理学实验二 经口急性毒性试验一、实验目得1、掌握实验动物分组方法2、测定 LD5 ０得试验设计原则3、小鼠得经口灌胃技术二、试剂与材料1、实验动物:(１)动物品种:健康成年 ICR 小鼠,体重 18g～22g（2）样品来源:首都医科大学实验动物部2、器材:注射器(1ml）、灌胃针头、烧杯、吸管、容量瓶、烧杯、棉签、动物秤。 3、试剂:敌敌畏（1400 ｍ g/ml)、苦味酸染液(标记用)。三、实验内容1、健康实验动物得选择与性别鉴定 选择健康得雄性小鼠(健康标准：毛顺、毛顺、无分泌物、反应敏锐。动物出现圆圈动作可能为中耳炎,废弃。) 肛门与生殖孔距离:大者为雄性,小者为雌性2、实验动物称重、编号与随机分组 选择体重在 18-2 ２ g 得小鼠,采纳随机分组得方法（动物按体重分为几个体重段,再从每个体重段分出各组动物),每组１ 0 只小鼠，用黄色得苦味酸饱与液标号 1~９,１ 0 号小鼠不标记。3、受试化学物溶液得配制(１)确定灌胃量:0、1 ｍ l/１ 0g (2)确定最高给药量,计算溶液浓度,估量给药总体积（3)药品称量及稀释4、小鼠灌胃技术 左手固定,右手持灌胃器,插入动物口腔,沿咽后壁缓缓插入食道,深度为口腔至剑突得距离。5、毒性体征得观察与 LD5 ０计算(1)毒性体征得观察： 染毒后注意观察小鼠中毒得发生、进展过程及死亡数与死亡时间 按表格记录动物体征及出现时间，记录死亡情况及时间,观察期为 3 ０ min（2）LD50 得计算： a、实验各组剂量得确定：设５组，每组雌雄动物各 10 只。 剂量组距 d 为: d 为相邻两个剂量组剂量对数之差 利用 lgLD0 依次加 d,取反对数,即可得出各组剂量。b、LD50 得计算(见附件):C、求半数致死量得 95%可信区间四、实验过程1、人员分工:本次实习同学分两个大组(A 组与 B 组),分别在不同实验室。每大组分 5 个小组,分别处理雌雄动物,每小组 10 只动物。 集体活动:１、 2、 3、 4、５ 组各 1 人，进行受试物配制。 各小组活动: 每小组 1 人(共 4 人),进行动物标记。（1-10 号) 每小组 1 人(共４人),进行体重记录。（1-１ 0 号) 每小组 1 人(共４人)，进行灌胃。(１-10 号) 每小组１人(共 4 人)，根据体重吸取受试物(0、１ ml／10 ｇ）五、剂量设计及受试物配制表见附件六、实验结果1、急性经口毒性试验原始记录（见附件)２ 、LD50 计算表(见附件）3、结果计算（根据中所给得剂量设计及受试物配制表计算） =(lg50 ０-ｌｇ 1 ００)÷4=(0、...
