仪器的正常运行,准确的结果数据是每个操作者所期待并向往的
那么仪器的正确使用和正确维护就显得尤为重要
下面就介绍下高效液相色谱使用和维护中的几个重要环节吧
实验前的准备工作: 1
为了保证流动相干净,流动相使用前都必须微膜过滤
为了避开流动相中气泡对仪器(气泡可能会对仪器及相关设备的正常使用及寿命产生一定影响)及分析结果的影响
运行液相泵前尽量先清洗泵柱塞部件
清洗液一般采纳 10%甲醇溶液,也有采纳 10%异丙醇溶液(5%甲醇或异丙醇等有机相溶液能避开微生物污染,但浓度不能太高,高于 20%缓冲液可能会导致盐结晶析出,碰到酸碱类物质可能会有比较强烈的反应;另外异丙醇粘度较大,清洗能力较强;也有采纳纯水清洗的,这样假如仪器每天使用还行,假如长期不用,为了防止微生物繁殖,纯水还得用含有有机相的清洗液置换出去)冲洗,这是为了保护泵柱塞和密封圈等部件在泵运行时不被结晶盐等磨损而导致泵头漏液
每天运行仪器前先排气
一般的液相色谱仪都有排气功能,没有的可以不接色谱柱开机运行几分钟排气
泵运行时尽量不采纳大流量模式
主要是换流动相或排气泡等,流量尽量设为 3
0ml/min 以内,这样更有利于保护泵柱塞杆和密封圈等部件的寿命
分析前先对色谱系统(整个流路)进行冲洗及平衡,尤其是色谱柱
先用纯甲醇冲洗 30 分钟,再换 10%甲醇水溶液冲洗 30 分钟,最后换含缓冲盐或酸碱类物质的流动相平衡 30 分钟
色谱柱假如长期没用,每一步冲洗、平衡量尽量为色谱柱柱容量 20 倍以上)
假如流动相中不含缓冲盐或酸碱类物质,纯甲醇冲洗完可直接换为流动相
使用色谱柱前知道或怀疑色谱柱中残留有或酸碱盐类物质,在用纯甲醇冲洗前增加一步 10%甲醇水溶液冲洗
假如色谱柱需要控温(升温),要先运行泵后再设柱温箱温度