《生物化学实验》教学大纲VIP免费

第1页共9页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第1页共9页《基础生物学实验B》教学大纲课程编号：08207017学时：51学分：1.5开课对象：生物科学专业课程类别：专业必修英文名称：BasicBiologyExperimentsB一、课程任务、目的生物化学是四年制本科生物专业开设的一门专业基础课，其中生物化学实验是重要环节。本实验课程通过生物化学分离、制备、分析、鉴定等实验（如滴定、比色、层析、电泳等），加强对学生基本技能的训练。同时要求学生了解掌握一些生化研究的理论和技术，为进入生命科学各分支学科的研究邻域打下基础。二、课程内容与基本要求实验一甲醛滴定法测定氨基氮一、目的要求：初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点二、器材：滴定管、吸量管、试管三、内容与方法：1、滴定标准甘氨酸，计算氨基氮回收率2、滴定未知浓度甘氨酸，计算氨基氮3、计算未知甘氨酸浓度实验二考马斯亮蓝染色法测蛋白质含量一、目的要求学习和掌握考马斯亮蓝G-250法测蛋白质含量的原理和方法。进一步掌握721型分光光度计的使用方法和原理。二、器材：721型分光光度计离心机研钵容量瓶刻度吸管试管三、内容与方法1、制备样品溶液2、制作标准曲线3、测定实验三血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳一、目的要求：第2页共9页第1页共9页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第2页共9页学习醋酸纤维薄膜电泳的操作，了解电泳技术的一般原理。二、器材：稳流稳压电泳仪、水平电泳槽、醋酸纤维薄膜、镊子、白瓷反应板、大培养皿三、内容与方法：1、浸泡薄膜2、点样3、电泳4、染色5、漂洗实验四凯氏定氮法测定总氮量一、目的要求：学习凯氏定氮法的原理和操作技术。二、器材：凯氏定氮仪、电炉、消化烧瓶、滴定管、吸量管三、内容与方法：1、消化2、蒸馏3、滴定实验五Folin－酚法测蛋白质浓度一、目的要求：掌握Folin－酚法测蛋白质浓度的原理和方法，学习标准曲线的制备。二、器材：试管、试管架、吸量管、恒温水浴锅、721分光光度计三、内容与方法：1、制备标准曲线（蛋白质浓度与反应生成的蓝色物质的光吸收值的关系曲线）2、未知浓度的蛋白与Folin－酚试剂反应，测出兰色物质光吸收值3、从标准曲线上查出对应蛋白浓度实验六苯丙氨酸聚氨酶（PAL）活力和比活力测定一、目的要求1、学习一种常用的酶活力测定法，并与前面学过的二种酶活力测定法相比较；2、掌握苯丙氨酸解氨酶活力与比活力测定的原理与方法，为后面该酶分离纯化的实验中测活力与比活力所需要；3、了解紫外分光光度计及其使用。二、器材：第3页共9页第2页共9页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第3页共9页三、内容与方法1、提取酶液2、酶活力测定3、蛋白质含量测定4、计算实验七硫酸铵分级沉淀分离苯丙氨酸解氨酶一、目的要求了解硫酸铵沉淀蛋白质的原理，掌握分级沉淀分离酶的基本操作和方法。二、器材天平冷冻离心机恒温水浴紫外分光光度计钟表冰浴试管烧杯玻棒刻度吸管研钵剪刀量筒离心管三、内容与方法1、酶液提取2、硫酸铵分级沉淀3、沉淀样品溶解4、酶活力测定实验八凝胶层析纯化苯丙氨酸解氨酶一、目的要求掌握葡聚糖凝胶柱层析法脱盐的原理和基本操作方法，分离上一个实验所得沉淀液中的酶蛋白和硫酸铵。二、器材层析柱紫外分光光度计721分光光度计恒温水浴钟或手表刻度吸管刻度试管试管滴管三、内容与方法1、层析脱盐：凝胶溶胀，灌胶，层析，收集2、酶活力测定3、蛋白质含量测定电子天平高速冷冻离心机恒温水浴紫外分光光度计721分光光度计剪刀研钵试管刻度小试管塑料离心管刻度吸管烧杯第4页共9页第3页共9页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第4页共9页实验九过氧化物酶活力测定一、目的要求：了解酶活力、比活力概念，通过测定过氧化物酶活力，掌握酶活力测定的一般方法。二、器材：天平、研钵、离心机、试管、量筒、恒温水浴锅、721分光光度计三、内容与方法：1、酶液制备（植物样品在酶抽提液中磨成匀浆，取清液）2、酶活力测定（愈创木酚溶液中加入一定量酶液，再加入过氧化氢溶液，迅速混匀并测定）实验十...