"云南省陇川县第一中学高二生物下册2.2.1动物细胞培养和核移植技术教案人教版"★新课标要求1．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。2．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。3．举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。★教学重难点重点：（1）动物细胞培养的过程及条件。（2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。（3）单克隆抗体的制备和应用。难点：（1）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。（2）单克隆抗体的制备过程。★课时安排2课时★教学过程（一）引入新课利用植物细胞可以培育成植物体，那么，你利用动物细胞能不能大量繁殖动物体，以提高繁殖率呢？这节课我们来学习动物细胞工程（二）进行新课[问题]动物细胞工程的常用技术手段有哪些？最基础的技术手段是什么？动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。最基础的技术手段是：动物细胞培养。1．动物细胞培养1.1概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。[分析]（1）需分散成单个细胞；（2）需要在培养基上培养；（3）动物细胞培养的实质是细胞增殖。1.2动物细胞培养的过程：（结合课本图2-16讲解）取动物组织块↓剪碎、胰蛋白酶处理分散成单个细胞↓细胞悬液↓转入培养液原代培养↓胰蛋白酶处理传代培养10代细胞讲解过程中解决一下问题：[问题]什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？悬液中分散的细胞很快就贴附在有丝分裂，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。[问题]如何打破接触抑制？需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分别继续培养，让细胞继续增殖。[问题]细胞传代培养代数有什么特点？传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了，一般来说，细胞在传至10～50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能发生变化，当继续传代培养时，少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性。所以目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。1.3动物细胞培养的条件（1）无菌、无毒的环境（2）营养：合成培养基成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。（3）温度和pH：适宜温度一般与动物的体温相近；pH为7.2～7.4。（4）气体环境：95％空气和5％CO2混合气体。[问题]如何保证无菌、无毒环境？（1）对培养液和所有培养用具进行无菌处理；（2）通常还需要在细胞培养液中添加一定量的抗生素；（3）应定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。1.4动物细胞培养技术的应用（1）可大规模生产一些有重要价值的生物制品。（2）培养的动物细胞可作为基因工程中常用的受体细胞。（3）培养的动物细胞可用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性（根据变异率）。（4）培养正常或病变细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。[填表比较]植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养动物细胞培养原理细胞全能性细胞增殖动物血清、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素胰蛋白酶、剪碎动物胚胎或幼龄动物器官、组织单个细胞细胞悬浮液50代细胞……细胞株细胞系原代培养传代培养培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖、植物激素葡萄糖、动物血清培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞或细胞产物2．动物体细胞核移植技术和克隆动物[设问题]为什么不能直接利用动物细胞培育动物体？动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。因此，需要借助核移植来实现。2.1动物核移植概念：是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。[分析]（1）移植的是动物细胞的细胞核；（2）利用去核卵母细胞作为受体细胞；（3）重组细胞需培育成一个新的胚胎。2.1体细胞核移植的过程：（结合图2-21分析讲解）[讲解]（1）卵母细胞的采集：从屠宰场...
