课题课题22土壤中分解尿素的细菌的土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分离与计数专题专题22微生物的培养与应用微生物的培养与应用一、课题背景一、课题背景11、、尿素尿素的利用的利用尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。后才能被植物利用。22、细菌利用尿素的原因、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶脲酶CO(NHCO(NH22))22脲酶脲酶+H+H22OO+CO+CO22NHNH3333、常见的分解尿素的微生物、常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌。某些真菌和放线菌。44、课题目的、课题目的①①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌一一..研究思路研究思路㈠㈠..筛选菌株筛选菌株㈡㈡..统计菌落数目统计菌落数目㈢㈢..设置对照设置对照11、实例：、实例：启示启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。要求，到相应的环境中去寻找。原因原因：因为热泉温度：因为热泉温度7070～～808000CC，淘汰了绝，淘汰了绝大多数微生物只有大多数微生物只有TaqTaq细菌被筛选出来。细菌被筛选出来。DNADNA多聚酶链式反应是多聚酶链式反应是一种在体外将少量一种在体外将少量DNADNA大量复制的技术，此项大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温技术要求使用耐高温（（939300CC）的）的DNADNA聚合聚合酶酶。。要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；括营养、生理、生长条件等；方法：方法：⑴⑴抑制大多数微生物不能生长抑制大多数微生物不能生长⑵⑵造成有利于该菌生长的环境造成有利于该菌生长的环境结果：结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。释等方法对它进行纯化培养分离。22、实验室中微生物的筛选原理：、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件人为提供有利于目的菌株生长的条件((包括营养、包括营养、温度、温度、pHpH等等))，同时抑制或阻止其他微生物生长。，同时抑制或阻止其他微生物生长。15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgSOMgSO4`4`7H7H22OO2.1g2.1gNaHNaH22POPO441.4g1.4gKHKH22POPO4433、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培培养基：养基：①①从物理性质看此培养基属于哪类？从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基固体培养基②②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素〖思考2〗该培养基对微生物（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是。具有只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以物才能分解尿素，以尿素尿素作为氮源。缺乏脲酶的作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。选择出分解尿素的微生物。44、培养基选择分解尿素的微生物的原理、培养基选择分解尿素的微生物的原理11、显微镜直接计数：、显微镜直接计数：利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。里样品中微生物的数量。（二）（二）.....
