生化实验生化实验(四)(四)肝中酮体的生成实验目的实验目的了解组织匀浆的制备方法,证明酮体生成是肝脏特有的功能。实验原理实验原理酮体:FA在肝脏经-氧化生成的乙酰CoA在酶的催化下转变成的三种中间代谢物的总称乙酰乙酸acetoacetate-羟丁酸-hytroxybutyrate丙酮acetone以丁酸作为底物,与肝组织匀浆(含酮体合成酶系)保温后即有酮体生成。酮体与含有亚硝基铁氰化钠的显色粉反应形成紫红色化合物实验步骤实验步骤1.肝匀浆、肌匀浆的制备取兔一只,气栓致死,迅速剖腹、取出肝和肌肉,组织匀浆器中打成匀浆,若匀浆不充分,再分别放入研钵中,研磨成匀浆,加入生理盐水按重量:体积=1:3稀释。试剂(滴)1234洛克溶液151515150.5M丁酸溶液30—30300.1M磷酸盐缓冲液15151515肝匀浆2020——肌匀浆———20蒸馏水—3020—3.将上列4支试管摇匀后,放置于37℃恒温水浴箱中保温40-50分钟。4.取出各管,各加入15%三氯醋酸溶液20滴,混匀,离心5分钟(3000转/分)。5.取白瓷反应板一块,从上述4支试管中各取出5滴离心液分别置于反应板的4个凹槽中,然后向4凹槽中各加入显色粉一小匙(约0.1g),观察并记录每凹所产生的颜色反应,并解释之。