躯体、内脏传入在脊髓背角会聚神经元的相互作用西安交通大学医学院生理教研室(西安710061)杨冬燕李强牛汉璋董皓3郭进33摘要在SD大鼠膀胱神经置埋藏电极,玻璃微电极细胞外记录脊髓背角躯体2内脏会聚神经元(SVCN)放电活动,观察分析躯体、内脏传入在脊髓背角的相互作用。结果:165个被腓肠肌神经传入激活的神经元中,有25个亦能被膀胱神经传入激活,此即SVCN。电刺激(拟痛刺激)膀胱神经1min后,25例SVCN中,14例腓肠肌传入诱发的晚成分显著增加,而对早成分则影响不大,提示拟痛刺激膀胱神经引起了躯体细传入末梢的突触前易化,导致突触后C反应增强,从而引起牵涉痛;5例呈抑制反应,提示内脏传入可能参与对躯体传入的突触前抑制;另外6例无显著改变。拟电针刺激腓肠肌神经1min后,14例内脏传入诱发的VSCN放电减少,亦似说明了穴位刺激镇痛可能是通过初级传入终末间的相互作用所致。主题词脊髓会聚神经元动物实验电刺激20世纪40年代,Ruch[1]提出会聚2投射学说,作为解释内脏牵涉痛发生的机理。Garrison等[2]证明猫脊髓存在躯体2内脏会聚神经元,且其实验结果支持“牵涉痛是由于躯体、内脏传入激活了相同脊髓神经元的活动所致”的假说。多年来Field等[3～7]用猫、猴、大鼠等动物研究了内脏、躯体于脊髓的会聚。关于猫、猴等动物的躯体2内脏会聚神经元(Somato2viscusconvergentneuron,SVCN)国外报道较多,但有关大鼠SVCN的国外文献报道很少。张晓泉、李强等[8,9]人首次先后对大鼠皮肤2肌肉、躯体2内脏传入于脊髓背角会聚神经元的类型进行了分类。朱忠良等[10]以牵拉大鼠膀胱作为内脏刺激,首次研究了电刺激腓肠肌神经的躯体传入和牵拉膀胱的内脏传入在脊髓背角神经元的会聚以及躯体2内脏传入的相互作用,为牵涉痛和电针镇痛机理提供了依据。但由于大鼠体积较小,内脏神经部位深、直径小,不易暴露,故对大鼠躯体传入和内脏传入会聚的研究很少。至今为止,未见有采用埋藏电极的方法研究大鼠VSCN的报道。本工作以脊髓大鼠作为实验对象,在内脏膀胱神经置埋藏电极,电刺激(拟痛刺激)膀胱传入3深圳宝安人民医院中医科33陕西师范大学生物系神经,观察脊髓背角神经元对内脏刺激的反应。旨在研究电刺激腓肠肌神经的躯体传入和电刺激内脏膀胱传入神经在脊髓背角的SVCN活动及其分类,以及拟痛电刺激膀胱传入神经和拟电针刺激外周腓肠肌传入神经对SVCN的相互作用,为牵涉痛和电针镇痛在脊髓部位的形成机理提供理论基础。材料和方法1实验动物与手术处理实验用成年SD大鼠,体重230～270g,雌雄不拘,戊巴比妥钠(40mg�kg,腹腔注射)麻醉下行常规气管插管术和颈静脉插管术;将动物固定于脑立体定位仪上,剪开硬脊膜,暴露脊髓,行T13～L2椎板切除术、左侧腓肠肌神经及膀胱神经分离术。油槽温度36～37℃,于腓肠肌神经上安置刺激电极;于膀胱神经上安置特制的保护电极。实验于动物轻麻醉状态下进行,箭毒制动(1～2mg�kg,静脉注射),人工呼吸,ECG监护,肛温维持在37～38℃。2躯体2内脏会聚神经元(SVCN)的确定用灌以0.5mol�L醋酸钠溶液(内含2%膀胺天兰)的玻璃微电极(尖端阻抗5～10M8)细胞外记录背角神经元的诱发放电。确定SVCN的方法是:用波宽0.3ms的单一方波(强度4～16V)分级刺激腓肠肌神经,当电刺激腓肠肌传入神经记录到脊髓背角神经元的最大单位诱发放电时,稳072陕西医学杂志2002年3月第31卷第3期定20min,继以单一方波(波宽:1ms;强度:25V)刺激膀胱神经,再观察该神经元的反应。凡可分别被腓肠肌神经和膀胱神经电刺激所激活,且对两种神经刺激的放电反应幅度相等的神经元即为SVCN。单位放电经常规放大,示波器显示,同时输入计算机处理,以1次�4s,叠加10次的放电数绘出刺激后序列密度直方图(Bin�4ms),并打印图形与数据。3组织学定位实验结束时,微电极通以阴极电流(20ΛA,5min),用10%的福尔马林(内含2%亚铁氰化钾)溶液灌流固定后作脊髓冰冻切片(厚60～80Λm),切片经焦油紫染色,镜下观察电极尖端位置。4统计学处理神经元放电频率以均数±标准差表示,单位放电变化采用t检验,并定义P<0.05为显著性界值。结果1躯体2内脏传人会聚神经元型式观察刺激腓肠肌传人神经在脊髓背角共记录到165个神经元单位放电。按其传入神经纤维类别的不同可分为:A型(n=56,33....
