球菌华中科技大学同济医学院附属协和医院熊艳革兰阳性球菌触酶(-)触酶(+)链球菌科微球菌科链球菌肠球菌微球菌葡萄球菌微球菌科内各属的主要鉴别要点触酶试验葡萄糖发酵试验动力对杆菌肽耐药(0.04U纸片)葡萄球菌属++-+微球菌属+---口腔球菌属V+--游动球菌属+-+V+:多数(≥90%)阳性;-:多数(≥90%)阴性;V:不定第一节葡萄球菌属一.生物学特性(一)形态与结构革兰染色阳性,呈圆球形,葡萄状排列。无鞭毛和芽胞。(二)培养特性需氧或兼性厌氧,营养要求不高。多数菌株耐盐性强,能在10%~15%NaCl琼脂中生长。24/12/29菌落:圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明,可产生不同的脂溶性色素。•①血琼脂:多数致病性菌株可产生透明溶血环,且菌落较大。•②高盐卵磷脂平板:菌落周围形成白色沉淀环,可用于筛选。•③亚磷酸钾甘氨酸琼脂:黑色扁平的小菌落。24/12/29(三)生化反应(三)生化反应触酶试验阳性。葡萄糖氧化发酵试验:发酵+,对糖的发酵反应不规则。多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。24/12/29(四)抗原构造(四)抗原构造1.蛋白抗原:葡萄球菌A蛋白(SPA)存在于金黄色葡萄球菌细胞壁。SPA可与人类IgG的Fc段非特异性结合而不影响Fab段,应用于协同凝集试验。抵抗吞噬细胞的吞噬。2.多糖抗原:型特异性①A型多糖抗原:带有β–N–乙酰葡萄糖胺的核糖醇,存在于绝大多数金葡菌中。②B型多糖抗原:甘油磷壁酸,来自非致病性葡萄球菌。③C型多糖抗原:(五)分类及分型葡萄球菌包括35个种及17个亚种•根据产生色素的不同分类•根据产生凝固酶与否进行分类•按噬菌体分型法分类葡萄球菌传统分类金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌产生溶血毒素+--产生凝固酶+--产生耐热DNA酶+--产生SPA+--新生霉素敏感性SSR致病性强弱无(六)抵抗力是抵抗力最强的无芽胞细菌之一。耐干燥可达数月。对龙胆紫敏感。易形成耐药性:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)已成为医院感染最常见的致病菌。二.致病性和免疫性(一)致病物质•金葡菌的致病性主要与其所产生的各种侵袭性酶,如:血浆凝固酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、溶纤维蛋白酶等,以及各种外毒素,如溶血毒素、杀白细胞毒素等有关。凝固酶•游离凝固酶:采用试管法检测•结合凝固酶:采用玻片法检测•金葡菌凝固酶试验均为阳性•凝固酶试验是鉴定金葡菌的重要标志游离凝固酶协同因子凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白血浆凝固结合凝固酶(位于菌体表面)纤维蛋白原纤维蛋白细菌凝集24/12/29•注意事项:①不要用枸橼酸盐血浆,以防止能利用枸橼酸盐的细菌出现假阳性。②玻片法必须用大量的细菌和少量的血浆。③试管法检查凝块形成时,不要摇动试管。凝固酶结合凝固酶(凝聚因子):纤维蛋白原受体—玻片法阳性游离凝固酶:类似凝血酶原物质,可被协同因子激活—试管法阳性(二)所致疾病葡萄球菌感染的特点是:感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。金葡、表皮和腐生是引起临床感染最常见的葡萄球菌。金葡引起的常见感染有:疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎等全身性感染。表皮葡萄球菌引起人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人工关节感染等。腐生葡萄球菌是女性尿路感染的重要病原菌。(三)免疫性•有一定天然免疫力。•病后获得的免疫力作用不强、不持久。三.微生物学检验细菌鉴定的基本程序标本直接涂片革兰染色镜检分离培养取可疑菌落鉴定试验和药敏试验结果报告(一)标本采集根据病种不同,采集不同标本脓液、创伤分泌液、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。(二)检验程序脓、穿刺液、尿液、痰脑脊液血液粪便、呕吐物增菌培养分离培养分离培养分离培养直接涂片染色鉴定试验和药敏试验菌落涂片染色血浆凝固酶耐热核酸酶药敏试验其它试验报告24/12/29(三)检验方法(三)检验方法1.直接镜检2.分离培养3.鉴定试验•①触酶试验•②血浆凝固酶试验•③甘露醇发酵试验•④耐热核酸酶试验:此酶与血浆凝固酶具有同等诊断意义。•⑤SPA的...