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植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。植物组织培养的概念植物组织培养的过程离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织脱分化植物激素:细胞分裂素、生长素植物体根、芽再分化外植体让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程.愈伤组织是指一些已经分化的细胞,经过激素的诱导,形成的具有分生能力的薄壁细胞团。将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。植物体细胞杂交的概念杂种植株再分化植物细胞的融合植物组织培养原生质体B原生质体A再生出细胞壁杂种细胞AB脱分化愈伤组织去壁去壁融合的原生质体AB人工诱导植物细胞A植物细胞B植物体细胞杂交的过程专题二细胞工程•制备单克隆抗体•动物细胞培养•动物细胞核移植•动物细胞融合动物细胞工程常用的技术是其他动物细胞工程技术的基础。1.动物细胞培养从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。1.1动物细胞培养的概念2.2.1动物细胞培养和核移植技术1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液剪碎胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(1.9)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,繁殖能力越强,越容易培养。1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液剪碎胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)原代培养贴壁生长接触抑制细胞贴壁细胞贴壁过程有关概念:原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞;将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。原代培养的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。细胞增殖缓慢,核型可能变化1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液剪碎胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)贴壁生长接触抑制贴壁细胞细胞株传代培养(50代左右)洗涤、稀释、分离传代细胞原代培养细胞系50代以后不死细胞动物细胞培养不能最终培养成生物体将贴满瓶壁的细胞从培养瓶中取出,重新用胰蛋白酶等处理,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。传代培养的细胞一般传至10代就不易传下去,只有极少数的细胞会继续传至50代左右,即便如此,传至50代以后的细胞绝大多数死亡,只有极少数细胞的克服细胞寿命的极限,成为不死的细胞。有关概念____传代培养:原代培养和传代培养50代细胞无限传代10代细胞原代培养细胞悬浮液多数组织细胞固定在表面生长和分裂随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖传代培养1.3动物细胞培养的条件1.无菌、无毒的环境(无菌处理、加一定的抗生素,防止污染、定期更换培养液)2.必需的营养物质(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、激素、促生长因子、动物血清等)3.适宜的温度:36.5±0.5度4.充足的氧气和适宜的酸碱度:O2和CO2(95%氧气和5%CO2);PH为7.2_7.4为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清?血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。有些氨基酸(必需氨基酸)动物细胞本身不能合成必须由培养液提供。血清中有胰岛素、生长激素等及多种生长因子。血清中还含有多种未知的活性物质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此,细胞培养时,要保证细胞能够顺利生长和增殖,一般须添加10%~20%的血清。思考:植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分培养结果培养目的植物组织培...

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