固相萃取柱知识点..VIP免费

1、使用阳离子固相萃取柱前为什么要用甲醇和水活化要是使用的是高聚物基质的阳离子柱，可直接上样，不用活化，要是使用的是硅胶基质的阳离子柱，活化是为了打开键合在硅胶上的碳基团链，使之充分发生作用，甲醇是为了与碳链互溶，用水过度是为了能和样品溶液相溶。2、固相萃取技术原理及应用一、固相萃取基本原理与操作1、固相萃取吸附剂与目标化合物之间的作用机理固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1）疏水作用力：如C18、C8、Silica、苯基柱等2）离子交换作用：SAX,SCX,COOH、NH2等3）物理吸附：Florsil、Alumina等2、pH值对固相萃取的影响pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于强阳/阴离子交换柱来讲，因为吸附剂本身是完全离子化的状态，目标物必须完全离子化才可以保证其被吸附剂完全吸附保留。而目标物的离子化程度则与pH值有关。如对于弱碱性化合物来讲，其pH值必须小于其pKa值两个单位才可以保证目标物完全离子化，而对于弱酸性化合物，其pH值必须大于其pKa值两个单位才能保证其完全离子化。对于弱阴/阳离子交换柱来讲，必须要保证吸附剂完全离子化才保证目标物的完全吸附，而溶液的pH值必须满足一定的条件才能保证其完全离子化。3、固相萃取操作步骤及注意事项针对填料保留机理的不同（填料保留目标化合物或保留杂质），操作稍有不同。1）填料保留目标化合物固相萃取操作一般有四步（见图1）：0活化----除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。（注意整个过程不要使小柱干涸）0上样----将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。（注意流速不要过快，以1ml/min为宜，最大不超过5ml/min）0淋洗----最大程度除去干扰物。（建议此过程结束后把小柱完全抽干）0洗脱----用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。（注意流速不要过快，以1ml/min为宜）如下图1:桂预处理“样品湎加2柱洗涤A分析物洗脱禎•t>•唏枇物』:于搦i復器信息图1固相萃取操作歩骤<填料保留目标合物）42）填料保留杂质固相萃取操作一般有三步（见图2）：0活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。（注意整个过程不要使小柱干涸）0上样--将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上，故此步骤要开始收集（注意流速不要过快）0洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集，合并收集液。（注意流速不要过快）此种情况多用于食品或农残分析中去除色素。如下图2：柱預处理祥品添加柱淀檢二、固相萃取方法的建立与优化固相萃取技术使用起来虽然比液液萃取简单，但建立一个固相萃取的方法并无快捷方式可走。建立固相萃取方法必须考虑与萃取过程相关的多种因素，归纳起来可通过下图来了解:方法建立如下图片l.jpg：翁子量、功能团丄按性、•濬解度“站純度的要求心检测方:;去的特姝性P有哪些可能的干扰“瀋剂的限制心检测方法所接受的水溶性洗脱滋需辱的有机決时沛4干扰物心分子量、功能团、极■性、濬解度点齢1①评怙萃取中的问题P:11n评估分折優求存祥品的特性」浓缩的弱求亠样品害要如何稀强*检测方法的灵敏度如何4祥話基液^从原样品濬液中萃取〈如环境水样n从固态样品释放分析物:（'匀浆、超声浪酒化）』」方法建立如下图片2.jpg：②肄疔初步的方法4不好口重新评估冋题Q淅物被洗脱的情况4好屮用没有基液的榻准舞法对帝斤物进行萃畅『好检脸从基酒中萃取舛析物的情况4I辰检测干扰物是否与幷■析物同时被洗脱屮I好屮海宾抒去卩1、初步固相萃取方法的建立建立初步的萃取方法要考虑：•选择合适的SPE柱•选择合适的固相萃取方法•方法的优化2、固相萃取柱的选择＜1）柱填料的选择首选根据目标化合物与干扰物的差异，如极性，分子量，pka值等，选择合适的填料。固相萃取柱的选择如下图片样—擁解干水规最大上样量最小洗脱体积甲碑或甲祥/水——土——己疑2）固相萃取柱规格的选择对于反相、正相和吸附型固相萃取柱来说，被萃取样品的质量不超SPE柱填料的5%（参考值，同一种SPE柱对不同的目标物选择性不同，吸附容量不同）；离子交换型的固相萃取柱，必须考虑离子交换的容量。不同厂家的小柱离子交换容...