课时2基因工程简介•一、基因工程的概念•概念:基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术
是指在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物,可实现对生物性状的改造
转录和翻译定向•二、基因操作的工具•1.基因的“剪刀”——限制性内切酶:主要存在于微生物中
•(1)作用:识别特定的,并能在特定的切点上切割DNA分子
•(2)特点:具有特异性
•2.基因的“针线”——DNA连接酶•作用:是将两个连接起来
脱氧核苷酸序列不同来源的DNA分子的黏性末端•3.基因的运载工具——运载体•(1)条件•①能够在宿主细胞中地保存
•②具有多个切点,以便与外源基因连接
•③具有某些,便于进行筛选
•(2)作用•①作为运载工具将转移到宿主细胞中
•②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制
•(3)常用的运载体:、噬菌体和动植物病毒等
复制并稳定限制酶标记基因目的基因质粒•1.基因工程的原理是什么
•2.DNA连接酶与DNA聚合酶各有什么作用
•三、基因操作的基本步骤•1.提取目的基因•(1)直接分离法:最常用的方法是
鸟枪法•2.目的基因与运载体结合:对质粒和目的基因必须用限制酶切割,使其产生相同的再加入•形成
•3.将目的基因导入受体细胞•途径:借鉴侵染细胞途径
•常用受体细胞:大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、动植物细胞等
•4.目的基因的表达和检测•检测方法:常用是否具有来判断是否获得了目的基因
•表达:受体细胞,才能说明目的基因完成了表达
同一种黏性末端DNA连接酶细菌、或病毒某种抗性表现目的基因控制的性状重组DNA分子•3.为什么经常选用细菌作为受体细胞
•思考探讨提示:•1.基因重组
•2.DNA连接酶是把DNA片段形成磷酸二酯键连接起来,DNA聚合酶是把单个的脱