高2015级高三复习时听写问题（基因工程）1．说说基因工程的原理、操作环境和目的分别是什么？——原理：基因重组；操作环境：生物体外；目的：定向改造生物的遗传性状。2．基因的“剪刀”是什么，它有什么作用？它有没有特异性？——限制性核酸内切酶（简称限制酶），能专一性识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，形成DNA末端（黏性末端或平末端）；限制酶有特异性。3．基因的“针线”是什么，它有什么作用？它有没有特异性？它有哪些类型？——DNA连接酶；将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，形成重组DNA分子。DNA连接酶没有特异性；有两种类型的DNA连接酶：E•coliDNA连接酶（只能“缝合”黏性末端）和T4DNA连接酶（能“缝合”黏性末端和平末端）。4．基因的“运输车”有什么作用？运载基因的载体应具备哪些条件？运载基因常用的载体有哪些？——作用：作为目的基因的运载工具，将目的基因转移到受体细胞内以及利用它在受体细胞内实现目的基因的大量复制。应具备条件：能在受体细胞内稳定保存并大量复制；有多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接；具有特殊的标记基因，以便筛选出含目的基因的受体细胞。常用的运载体有质粒（最常用）、噬菌体、动植物病毒。5．获取目的基因的方法有哪些？说说PCR技术的原理、条件分别是什么？——获取目的基因的方法：一是从基因文库中获取，二是人工合成（常用的是反转录法和化学合成法）；扩增目的基因的方法：PCR技术，其原理为：DNA双链复制；条件为：PCR扩增目的基因时要有一段已知目的基因的核苷酸序列(前提条件)、四种脱氧核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)等。6．基因工程的核心步骤是什么？一个完整的基因表达载体由哪些部分组成？说说启动子、终止子、标记基因分别有什么作用？——核心步骤：基因表达载体的构建；基因表达载体的组成：启动子+目的基因+终止子+标记基因；启动子：位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA；终止子：位于基因的尾端，使基因转录停止；标记基因：鉴别受体细胞中是否含目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来。7．将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的方法分别是什么？——导入植物细胞的方法：农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法，其受体细胞可以是受精卵，也可以是体细胞(但得到重组细胞之后需经植物组织培养技术培育成转基因植物)；——导入动物细胞的方法：显微注射法，其受体细胞为受精卵(早期胚胎也可以)，得到重组细胞之后需经早期胚胎培养、胚胎移植等技术才可以培育成转基因动物。——导入微生物细胞的方法：感受态细胞法。用Ca2+处理细胞，使细胞成为感受态，然后让其与含目的基因表达载体的缓冲液混合，从而完成转化。8．在分子水平检测目的基因的三个阶段及其相应的方法分别是什么？哪一阶段的检测才能真正说明目的基因表达成功？——第一阶段：检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，方法是DNA分子杂交技术，要用含目的基因的DNA片段采用同位素标记制作探针，使探针与转基因生物基因组DNA杂交，看是否出现杂交带。——第二阶段：检测转基因生物内是否转录出了mRNA，方法是分子杂交技术，利用同位素标记的探针与转基因生物中提取的mRNA杂交，看是否出现杂交带。——第三阶段：检测转基因生物内是否翻译成了蛋白质，方法是抗原—抗体杂交技术，从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行杂交，看是否出现杂交带。——第三阶段的检测，即目的基因在转基因生物体内翻译出了相应的蛋白质才能真正说明目的基因表达成功。9．在个体生物学水平检测目的基因是否表达成功的依据是什么？例如如何从个体生物学水平检测抗虫基因表达成功？——依据：看转基因植物是否具有目的基因控制的性状确认目的基因已成功表达。如判定抗虫植物体内的抗虫基因是否表达成功，从个体生物学水平来看应进行抗虫接种实验（即让虫食用转基因植物），以确认是否具有抗性以及抗性的程度。10．什么是基因治疗？可以分为哪些类型？某血友病女性患者通过基...
