课题2-土壤中分解尿素的细菌的分离与计数-(6)VIP专享VIP免费

专题二微生物的培养与应用专题二微生物的培养与应用课题背景课题背景11、尿素的利用、尿素的利用尿素尿素是一种重要的是一种重要的农业氮肥。农业氮肥。但是但是尿素尿素不能直接不能直接被农作物被农作物吸收吸收。只有当土壤中的细菌。只有当土壤中的细菌将尿素将尿素分解成分解成氨氨之后才能被之后才能被植物利用。植物利用。22、细菌利用尿素的原因：、细菌利用尿素的原因：CO(NHCO(NH22))22脲酶脲酶+CO+CO222NH2NH33+HH22OO脲酶脲酶能合成能合成。。33、常见的分解尿素的微生物、常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌真菌和和放线菌放线菌也能分解尿素。也能分解尿素。44、课题目的、课题目的①①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌一一..研究思路研究思路㈠㈠..筛选菌株筛选菌株㈡㈡..统计菌落数目统计菌落数目㈢㈢..设置对照设置对照11、实例：、实例：启示：启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。要求，到相应的环境中去寻找。原因：原因：因为热泉温度因为热泉温度7070～～808000CC，淘汰了绝，淘汰了绝大多数微生物只有大多数微生物只有TaqTaq细菌被筛选出来。细菌被筛选出来。DNADNA多聚酶链式反应多聚酶链式反应是是一种在体外将一种在体外将少量少量DNADNA大量复制大量复制的技术，此项的技术，此项技术要求使用技术要求使用耐高温耐高温（（939300CC）的）的DNADNA聚合聚合酶。酶。㈠㈠..筛选菌株筛选菌株22、实验室中微生物的筛选原理：、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于人为提供有利于目的菌株目的菌株生长的条件生长的条件((包括营养、温度、包括营养、温度、pHpH等等))，同时，同时抑制抑制或阻止或阻止其他微生物生长。其他微生物生长。怎样配置能筛选怎样配置能筛选分解尿素的细菌分解尿素的细菌的培的培养基呢？养基呢？观看实验过程，然后完成导学案观看实验过程，然后完成导学案15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgSOMgSO4`4`7H7H22OO2.1g2.1gNaHNaH22POPO441.4g1.4gKHKH22POPO4433、、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：②②从物理性质看此培养基属于哪类？从功能上从物理性质看此培养基属于哪类？从功能上属于哪类培养基？属于哪类培养基？固体培养基固体培养基①①在此培养基中哪些作为碳源、氮源？在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：碳源：葡萄糖、尿素葡萄糖、尿素氮源：氮源：尿素尿素选择培养基44、培养基、培养基选择分解尿素的微生物选择分解尿素的微生物的原理的原理选择培养基：选择培养基：？在微生物学中，将在微生物学中，将允许特定种类允许特定种类的微生物生长，的微生物生长，同时同时抑制或阻止抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。其他种类微生物生长的培养基。1.1.稀释涂布平板法（稀释涂布平板法（活菌计数法活菌计数法））每克样品中的菌落数＝每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M(C÷V)×MCC代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，VV代表涂布平板时所用的稀释液的体积代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)(ml)，，MM代表稀释倍数。代表稀释倍数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。原理：原理：㈡㈡..统计菌落数目：统计菌落数目：方法有哪些？注意事项注意事项①①为了保证结果准确，一般选择菌落数在为了保证结果准确，一般选择菌落数在3030——300——300的平板进行计数。的平板进行计数。②②为使结果接近真实值可将为使结果接近真实值可将同一稀释度涂布到同一稀释度涂布到三个或三个以上的平板中三个或三个以上的平板中，培...