《基础生物学实验 B》教学大纲课程编号:08207017 学时:51 学分:1.5开课对象:生物科学专业 课程类别:专业必修英文名称:Basic Biology Experiments B 一、课程任务、目的生物化学是四年制本科生物专业开设的一门专业基础课,其中生物化学实验是重要环节。本实验课程通过生物化学分离、制备、分析、鉴定等实验(如滴定、比色、层析、电泳等),加强对学生基本技能的训练。同时要求学生了解掌握一些生化研究的理论和技术,为进入生命科学各分支学科的研究邻域打下基础。二、课程内容与基本要求 实验一 甲醛滴定法测定氨基氮一、目的要求:初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点二、器材:滴定管、吸量管、试管三、内容与方法: 1、滴定标准甘氨酸,计算氨基氮回收率 2、滴定未知浓度甘氨酸,计算氨基氮 3、计算未知甘氨酸浓度实验二 考马斯亮蓝染色法测蛋白质含量一、目的要求学习和掌握考马斯亮蓝 G-250 法测蛋白质含量的原理和方法。进一步掌握 721 型分光光度计的使用方法和原理。二、器材:721 型分光光度计离心机研钵容量瓶 刻度吸管 试管 三、内容与方法1、制备样品溶液2、制作标准曲线3、测定实验三 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳一、目的要求:学习醋酸纤维薄膜电泳的操作,了解电泳技术的一般原理。二、器材:稳流稳压电泳仪、水平电泳槽、醋酸纤维薄膜、镊子、白瓷反应板、大培养皿三、内容与方法:1、浸泡薄膜2、点样3、电泳4、染色5、漂洗实验四 凯氏定氮法测定总氮量一、目的要求:学习凯氏定氮法的原理和操作技术。二、器材:凯氏定氮仪、电炉、消化烧瓶、滴定管、吸量管三、内容与方法:1、消化2、蒸馏3、滴定实验五 Folin-酚法测蛋白质浓度一、目的要求:掌握 Folin-酚法测蛋白质浓度的原理和方法,学习标准曲线的制备。二、器材:试管、试管架、吸量管、恒温水浴锅、721 分光光度计三、内容与方法:1、制备标准曲线(蛋白质浓度与反应生成的蓝色物质的光吸收值的关系曲线)2、未知浓度的蛋白与 Folin-酚试剂反应,测出兰色物质光吸收值 3、从标准曲线上查出对应蛋白浓度实验六 苯丙氨酸聚氨酶(PAL)活力和比活力测定一、目的要求1、 学习一种常用的酶活力测定法,并与前面学过的二种酶活力测定法相比较;2、 掌握苯丙氨酸解氨酶活力与比活力测定的原理与方法,为后面该酶分离纯化的实验中测活力与比活力所需要;3、 了解紫外分光光度计及其使用。二、器材:电子天平高速冷冻离心...