1-046-大肠杆菌检查法标准操作程序VIP免费

下载后可任意编辑1 目的：法律规范大肠杆菌检查操作，保证检验结果准确。2 范围：本程序适用于药品大肠杆菌的检查。3 责任者：QC 员、QC 复核人员、QC 主任。4 程序：4.1 试药与试液 除特别注明外，试验中所用的试剂均为分析纯试剂，水为纯化水。4.1.1 0.9%无菌氯化钠溶液取氯化钠[NaCl]9.0g，加水使溶解成 1000ml，121℃灭菌 20 分钟。4.1.2 无菌磷酸盐缓冲溶液(pH7.2)取磷酸氢二钠[Na2HPO4·12H2O]25.8g 和磷酸二氢钠[NaH2PO4·H2O]4.4g，加水使溶解至 1000ml，121℃灭菌 20 分钟。4.1.3 α－萘酚乙醇试液取 α－萘酚 6.0g，加无水乙醇溶解使成 100ml。4.1.4 40％氢氧化钾试液取氢氧化钾 40g，加水溶解使成 100ml。4.1.5 靛基质试液取对二甲氨基苯甲醛[C9H11NO]1g，加入 95%乙醇[C2H5OH]95ml，充分振摇，使完全溶解后，取浓盐酸[HCl]20ml 缓缓滴入，边加边振摇，以免骤热导致溶液色泽变深，置冰箱保存，备用。4.1.6 甲基红试液取甲基红[C15H15N3O2]0.1g，加 95%乙醇[C2H5OH]300ml 与水适量，使溶解，再加水至 500ml，即得。4.1.7 V-P 试液取 α-萘酚[C10H7OH]6.0g，加无水乙醇[C2H5OH]使溶解成 100ml。另取氢氧化钾 40.0g，加水使溶解成 100ml。分别将试药与各溶剂混合即得。4.1.8 革兰染色液4.1.8.1 沙黄染液取沙黄 0.25g，加 95%的乙醇[C2H5OH]10ml，使完全溶解后，加水至 100ml。下载后可任意编辑4.1.8.2 结晶紫染液取结晶紫[C25H30ClN3]1.0g，加 95%的乙醇[C2H5OH]20ml，使溶解，加 1%的草酸铵溶液 80ml，混匀。静置 48 小时使用，置密闭棕色瓶中储存。4.1.8.3 碘试液取碘化钾[KI]2.0g，加水 3 5ml使溶解，加入碘片[I2]1.0g，使全部溶解后，加水稀释至 300ml，置密闭棕色瓶中储存。4.1.8.4 95％乙醇。4.1.9 溴麝香草酚蓝指示液4.2 培育基的种类4.2.1 营养肉汤培育基4.2.2 营养琼脂培育基4.2.3 胆盐乳糖培育基（BL）4.2.4 4-甲基伞形酮葡糖苷酸培育基(MUG)4.2.5 乳糖培育基4.2.6 5%乳糖培育基4.2.7 蛋白胨水培育基4.2.8 磷酸盐葡萄糖胨水培育基4.2.9 枸橼酸盐培育基4.2.10 曙红亚甲蓝琼脂培育基（EMB）4.3 对比用菌液 取大肠杆菌[CMCC (B) 44102]的营养琼脂斜面培育物少许，接种至 5ml 营养肉汤培育基内，361℃培育 18 24小时后，用 0.9%无菌氯化钠溶液稀释至1:106，使对比菌液加入量含菌 50 100个（一般用量为 0.1m1），其菌数在做阳性对比的同时用...