平菇黑色素提取纯化鉴定及功能试验

子实体黑色素提取 研究平菇中对形成色泽的物质提取纯化，及功能研究。目前国内外对平菇中的黑色素类物质并没有做相关研究。 广义的黑色素包括两大类，一类是Tyr，多酚及他们相关化合物代谢的终产物黑色素melanin，这类黑色素是复杂黑色高聚物，又可分为三类：真黑素（eumelanin）、棕黑素（phaeomelanin）和异黑素（allomelanin）。真黑素含氮原子，不含硫原子，颜色为深棕色或黑色；棕黑素含氮原子和硫原子，颜色略带红色的棕色和黄色；异黑素呈棕色或黄色，主要存在于植物中。 另外一大类属于花色苷类黑色素，主要分布于植物中。 关于真黑素的生物合成，目前认为酪氨酸酶（TYR)是它们形成的关键酶，酪氨酸在酪氨酸酶连续催化作用下氧化成多巴，再氧化成多巴醌，后者经环化进一步氧化成某些中间产物。中间产物经重排和脱梭生成5,6 一二轻基吲哚，后者再氧化生成相应的酮。吲哚-5,6-醌是形成真黑色素的主要前体，它与上述一些中间产物聚合生成真黑色素，但真黑色素的结构尚不完全清楚。 棕黑色素的形成过程，由酪氨酸到多巴醌与真黑色素是一致的。但在多巴醌以后的反应中有半胱氨酸(cysteine)参加，产生5-Cys 一多巴和5-Cys-多巴醌，后者经环化、脱梭成为苯并嚎嗦的衍生物，这种衍生物经过聚合生成分子量更大的棕黑色素。棕黑素的形成过程，见图1.3: 可见，真黑素与棕黑素的主要区别就是在其合成过程中是否有半胱氨酸的参与，并且半胱氨酸是唯一的参与棕黑色素合成的硫化物。半胱氨酸与多巴醌的加成速度远远大于多 巴醌分子内的环化速度，当半胱氨酸存在时，即使量非常小，反应也倾向于合成棕黑素。 异黑素是在多酚氧化酶(polyphenol oxidase)存在下通过多酚氧化聚合而成的。 第二类花色苷类黑色素是花色素与糖以糖昔键结合而成的一类化合物。现已查明，天然花色昔配基的基本结构为 3, 5, 7 一三轻基-2 一苯基苯并吠喃，结构式为图 1.4: 在花色素 A 环 3,5,7 位上的羟基以糖苷键与糖结合时便形成花色苷，由于糖结合的方式不同，如结合糖的种类、数量、位置的不同，花色苷的种类也不相同。 1.4 天然黑色素的萃取方法 天然黑色素的萃取应根据不同原料所含色素性质的不同来选择，一般要求溶剂选择性强，即溶解色素的能力强，对其它杂质成分溶解力差。黑色素的萃取运用其溶于碱性溶液而在酸性溶液中形成沉淀的性质;花色昔类黑色素的萃取运用其易溶于水、乙醇等溶剂的性质。 目前，对天然黑色素的萃取方法有水法、醇法和碱法...