ABI Veriti 梯度PCR 仪使用说明 基因有限公司 Gene Company Limited (声明:此说明仅供一般操作参考,未经厂家审核也不代表任何技术承诺,请以原版资料为准) 操作步骤: 1、打开PCR 仪的热盖,插入0.2ml 的样品管。盖好热盖。 2、打开PCR 仪的电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟。 3、初始化完成后,显示主菜单: 4、点“Brow se/New Methods”,进入PCR 程序列表: 5、可以直接点一个PCR 程序,选择“Start Run”运行;点右边的符号,可以选择不同的文件夹。如要新建一个PCR 程序,点“New ”,出现 PCR 程序: 6、添加一段程序:点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一段新的程序。 7、修改循环数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。 8、增加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步骤。 9、删除一个步骤:点“Step”位置,在点“Delete”,软件将该步骤删除。 10、建立梯度模式: 1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下 2)点“VeriFlex step”,出现梯度创建窗口: 输入 6 个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的 1、2 两行加热孔,全部输好后,点“Done”确定。注意:相邻的两个梯度温度之差最大不能超过 5 ℃! 11、建立渐变模式: 1)点中一个步骤,再点“ Option ”键,出现选项如下 2)点“Auto Delta ”,出现渐变模式创建窗口。 点“Staring Cycle”,输入起始循环数;点“Delta Temperature”,输入温度变化值;点“Delta Time”,输入时间变化值。渐变模式适用于 touchdown PCR,可以提高 PCR反应的特异性。例:输入起始循环数为 2,温度变化值为+0.5℃,时间变化值为+5s,则表示从第 2 个循环开始,每循环一次升温 0.5℃,时间增加 5s。 12、增加暂停步骤: 1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下 3)点“Pau se”,出现如下窗口。 输入暂停的起始位置,暂停间隔和暂停时间,点“Done”确定。上图表示每隔 10 个循环暂停10s,在 10 个循环的第 1 个循环之前暂停。 13、编辑PCR 程序完成后,点“Sav e”保存。 点“Ru n Method ”,输入PCR 程序名称;点,选择保存PCR 程序的文件夹(如果要保存在USB 文件夹中,需要先插U 盘)。再输入反应体积和热盖温度(这两项在运行...