精品文档---下载后可任意编辑DON 模拟表位的两种表达载体的构建及应用讨论的开题报告题目：DON 模拟表位的两种表达载体的构建及应用讨论一、讨论背景与意义DON（2-氧基-1，3-二羟库马林）是一种真菌产生的强有力毒素，对多种生物体具有广谱毒性。因此，讨论 DON 的合成机制和作用机理对于食品安全和生态环境的保护具有重要意义。近年来，人们对于 DON 合成的讨论主要集中于究竟哪些基因参加了DON 的合成过程、这些基因编码的酶是如何协同作用等问题。而表达载体是基因工程学中最为重要的工具之一，因而选择合适的表达载体对于DON 相关基因的讨论至关重要。本次讨论旨在构建两种表达载体，用于表达与 DON 合成相关的基因，在该基础上，为讨论 DON 的合成机理和毒性机制打下基础，并且为基因工程开发提供有用的工具。二、讨论目的1、构建两种适用于 DON 表位模拟的表达载体；2、通过克隆、转染、表达等方法将 DON 相关的基因成功表达；3、对于表达的效果、活性以及获得的蛋白进行进一步的讨论分析；4、为 DON 合成和毒性机理的讨论提供一定的技术支持；5、为基因工程开发提供有用的工具。三、讨论内容及所需技术1、构建两种适用于 DON 表位模拟的表达载体；2、以 DNA 克隆、PCR、RACE、关键酶限制酶切、质粒提取等为基本技术手段，对 DON 相关基因进行克隆和限制酶酶切等实验操作；3、通过转染技术实现基因表达；4、利用 SDS-PAGE、Western Blot、ELISA 等各种技术手段对表达的效果、活性以及获得的蛋白进行分析。四、讨论进度安排精品文档---下载后可任意编辑第一年：1、进行相关的文献调研；2、设计两种表达载体，并进行基因克隆和纯化；3、对表达载体进行鉴定和表达实验的筛选；4、对表达效果以及获得的蛋白进行初步的鉴定。第二年：1、对所获得的样品进行进一步的纯化和鉴定；2、对获得的蛋白进行活性筛选和鉴定；3、以体外抗原诱导模型为基础，开展与毒性有关的实验；4、撰写讨论报告，完成讨论论文的撰写和论文答辩。五、讨论成果预期1、成功构建两种适用于 DON 表位模拟的表达载体；2、通过克隆、转染实现 DON 相关基因的表达；3、对于基因表达效果以及鉴定和活性分析等提供实验数据；4、提出一种表达 DON 相关基因的技术方法；5、为 DON 合成和毒性机理的讨论提供有用的工具；6、发表相关学术论文。六、讨论团队及硬件设施条件本项目的讨论团队由生物学、生物技术、食品科学等多学科专业组成，团队人员有...
