单克隆抗体的制备原理

单克隆抗体的制备方法与原理 本文是由fantibody 全球抗体搜索引擎为大家所提供的有关单克隆抗体的制备方法与原理，希望可以帮到大家 1975 年Kohler 和Milstein 发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既可产生抗体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来的细胞群所产生的，所以它的免疫球蛋白属同一类型，质地纯一，而且它是针对某一抗原决定簇的，因此特异性强，亲合性也一致。单克隆抗体（McAb）的特性和常规血清抗体的特性比较见2-3。 表2—3 单克隆抗体（McAb）和常规免疫血清抗体的特性比较 项目 常规免疫血清抗体 McAb 抗体产生细胞 多克隆性 单克隆性 抗体的结合力 特异性识别多种抗原决定簇 特异性识别单一抗原决定簇 免疫球蛋白类别及 亚 类 不 均 一性，质地混 杂 同一类属，质地纯一 特异性与亲合力 批 与批 之间 不 同 特异性高，抗体均 一 有效 抗体含 量 0.01～ 0.1mg/ml（小鼠腹 水 ） 0.5～ 5.0mg/ml(小鼠腹 水 ) 0.5～ 10.0μg/ml（培 养 物上清液 ） 用于常规免疫学实 验 可用 单抗组 合应 用 抗原抗体形成格 子 结构 （沉 淀反 应 ） 容 易 形成 一般 难 形成 抗原抗体反 应 抗体混 杂，形成2 分 子 反 应 困 难 ，不可逆 可形成2 分 子 反 应 ，可逆 单克隆抗体的制备方法如 下 。 （一）动物的选 择 与免疫 1． 动 物 的 选 择 纯 种 BALB/C 小 鼠 ， 较 温 顺 ， 离 窝 的 活 动 范 围 小 ， 体 弱 ， 食 量 及 排污 较 小 ， 一 般 环 境 洁 净 的 实 验 室 均 能 饲 养 成 活 。 目 前 开 展 杂 交 瘤 技 术 的 实 验 室 多 选 用 纯 种BALA/C 小 鼠 。 2． 免 疫 方 案 选 择 合 适 的 免 疫 方 案 对 于 细 胞 融 合 杂 交 的 成 功 ， 获 得 高 质 量 的 McAb至 关 重 要 。 一 般 在 融 合 前 两 个 月 左 右...