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实验四酶的特性实验

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说明:本实验由四个小实验组成,其中第一个实验(酶的专一性)必做,其他三个小实验选做(至少做一个) 写实验报告时,可以只写需要做的实验内容! 实验四 酶的特性实验 一、实验目的 酶是生物催化剂,生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH 对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。 二、实验内容 本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH 对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4 个小实验组成。 (一)酶的专一性 1、实验原理 本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜,能氧化具还原性的糖,生成砖红色沉淀氧化亚铜。 2、材料、仪器与试剂 (1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液 (2)仪器:恒温水浴;沸水浴;试管及试管架; (3)试剂:2%蔗糖溶液;溶于 0.3% NaCl 的0.5%淀粉溶液;班氏试剂。 3、实验操作 (1)稀释唾液的制备 ①唾液的获取 用一次性杯取一定量的饮用水,漱口以清洁口腔,然后在嘴中含 10-20ml 饮用水,轻漱2min 左右时间,即可获得唾液的原液,内含唾液淀粉酶。 ②不同稀释度唾液的制备(用大试管) 本实验需制备1:1、1:5、1:20、1:50、1:200 等五个不同浓度的稀释唾液。 举例说明:1:5 指的是稀释了5 倍的唾液,制备方法为1 份原液+4 份蒸馏水。 1:20 指的是稀释了20 倍的唾液,制备方法为1 份1:5 的稀释液+3 分蒸馏水。 (2)唾液淀粉酶最佳稀释度的确定(严格按表1 添加顺序做实验,用小试管做实验) 表1 唾液淀粉酶稀释度的确定 管号 1(1:1) 2(1:5) 3(1:20) 4(1:50) 5(1:200) 0.5%淀粉溶液(滴) 4 4 4 4 4 稀释唾液(m l) 1 1 1 1 1 37℃恒温水浴中保温5 分钟 班氏试剂(m l) 1 1 1 1 1 沸水浴2~3 分钟 实验结果 (2)淀粉酶的专一性 表2 淀粉酶专一性实验 (二)温度对酶活力的影响 1、实验原理 酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下,酶的反应速度最高。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色,...

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