合方鲫肌间骨骨化过程及形态学观察

合方鲫肌间骨骨化过程及形态学观察打开文本图片集DOI：10.7612/j.issn.10002537.2024.02.006摘要利用整体骨骼染色和形态学解剖方法，对合方鲫仔稚鱼肌间骨出现时期、形态发育以及成鱼肌间骨数目、形态、分布进行观察.结果表明合方鲫肌间骨是在主体骨骼完全形成后开始出现，随着生长肌间骨形态逐渐复杂化；肌间骨从尾部往躯体前端逐渐出现，形态由简单到复杂，尾部末端骨化明显；肌间骨数量和形态在体轴中呈现梯度差异.关键词合方鲫；肌间骨；形态发育OssificationProcessandMorphologyofIntermuscularBonesinHybridsCrucianCarpWANGJing，ZHANGQiao，ZHAOQiong，ZHAOFeiyue，HANHui，LINYannan，LOUKaikun，LIUShaojun*（StateKeyLaboratoryofDevelopmentalBiologyofFreshwaterFish，CollegeofLifeSciences，HunanNormalUniversity，Changsha410081，China）Keywordshybridcruciancarp；intermuscularbone；morphologicaldevelopment鲫属鲤科，鲤亚科，鲫属.湖南师范大学鱼类发育生物学讨论室以雌性日本白鲫和雄性红鲫为亲本进行杂交，获得了杂交子代二倍体合方鲫.二倍体合方鲫体色为青灰色，具有生长速度快、肉质鲜嫩、抗逆性强等特征[8].利用雌性二倍体合方鲫与雄性四倍体鲫鲤（红鲫（♀）×鲤鱼（♂））交配还培育出不育的三倍体合方鲫.本讨论选取二倍体和三倍体合方鲫为材料，利用整体骨骼染色法对合方鲫仔稚鱼肌间骨的发育过程进行系统观察，并对成鱼进行形态解剖，分析不同倍性的合方鲫肌间骨数目和形态差异，了解合方鲫肌间骨骨化的基本规律以及形态分布特点，为后期基因敲除培育无肌间骨的优质鲫奠定基础.1 材料与方法1.1 实验材料本讨论中的二倍体合方鲫和三倍体合方鲫均取自教育部“多倍体繁殖及育种技术”工程讨论中心.从受精后 13 天开始，每隔 3 天选取发育正常的仔、稚鱼作为样本用于骨骼染色.每隔 3 天取一次样，每次每个样本 10尾，用 4%多聚甲醛固定，取至肌间骨全部出现为止.用于解剖与形态观察的样本按月龄取材，每次 8 尾.1.2 合方鲫仔、稚鱼整体骨骼染色结合柯中和[5]及吕耀平[6]等人的实验方法，对合方鲫仔、稚鱼进行整体骨骼染色.具体操作步骤如下：（1）用去离子水漂洗样本 3 次，每次30min，去除多聚甲醛；（2）将仔鱼放置于 TBST 溶液中（50mmol/LTrispH7.4，150mmol/LNaCl，体积分数为 0.1%的 TritonX100）处理30min，用去离子水漂洗 10min，以去除残余的 TBST 溶液；（3）转移标本至 1%KOH 溶...