TK对脑缺血NGF的影响研究VIP专享

TK 对脑缺血 NGF 的影响讨论 本文作者：边颖 1 王金春 1 商艳君 2 作者单位：1.沈阳市第五人民医院神经内一科 2.辽宁工业大学医院内科 检测指标及方法 1 神经功能缺失评分 实验前先对大鼠进行训练，采纳神经损伤评分［4］(NSS)。术后第 1 天，NSS8～12 分的大鼠进入本实验。术后第 1、3、7 天，对 3组大鼠进行评分及方差分析。 2 脑梗死体积测定 将大脑由额极至枕极分为 5 枚脑片，2mm/片，立即置于2%TTC(红四氮唑)溶液中，37℃水浴 30min，4%多聚甲醛固定30min。显微图像分析系统采集每片脑切片上、下面图像，分析每片脑切片上、下面脑梗死面积。根据梯形法则计算脑梗死体积。 3 免疫组化染色 梗死后 3d，将大鼠用 10%水合氯醛麻醉，4%多聚甲醛心内灌注后取脑，固定 24h，组织脱水包埋。在梗死灶中心部位，相当于以前囟为中心，冠状面+1～－1mm，每隔 100μm，连续 7μm 切片 5 张，对 NGF 进行免疫组化染色。一抗为兔抗 NGF(1∶200)，二抗为生物素化羊抗兔 IgG。显色底物为 DAB 显色剂。 4NGF 测定 将染色后的脑组织切片取梗死周围皮质，进行显微图像采集、分析(MetaMorph/DP10/BX41)，记录经过处理软件包量化后的灰度值。 5 统计学方法 用 SPSS11.0 统计软件做方差分析。数据以均数±标准差(x 珋±s)表示，P＜0.05 为差异有统计学意义。 结果 1NSS 评分 3 组神经功能缺损减轻。TK 组第 3 天 NSS 评分与其他 2 组的差异有统计学意义(P＜0.05)。见表 1。 2 动物模型经切片、TTC(红四氮唑)染色见图 1～图 2。 3 脑梗死体积的比较 3 组均有梗死灶形成，但 TK 组梗死灶体积(30.54%±3.47%)较NS 组、空白对比组(38.43%±5.73%，39.67%±4.98%)明显减轻(P＜0.05)。 4 缺血区 NGF 免疫组化结果 大脑中动脉闭塞后脑缺血区 NGF 增多，而注射 TK 后，NGF 细胞明显增多，TK 组与其他 2 组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表 2 及图 3～图 4。 讨论 有学者提出，脑组织缺血性损伤早期，假如 KKS 受到激活而参加一系列的生理生化反应，可以加重脑组织损伤，原因为 KKS 增加通透性和脑水肿［6］。Zausinger 等［7］讨论显示，在局灶性脑缺血前 30min 给予激肽 B2 受体拮抗剂(LF16－0687MS)，可加快缺血性脑组织的功能恢复。另外，Xia 等［8］提出，在脑组织缺血后 8h，给予不同的治疗，结果不同:注射人 TK 基因可使大鼠缺血性脑梗死的体积...