脓汁标本中病原性球菌的鉴定实验目的：1 、掌握病原性球菌的形态和培育特性。2 、熟悉病原性球菌的分离和鉴定程序。实验材料：（1）标本：脓汁（2）培育基：血琼脂平板、液体培育基（3）其他：试管、载玻片、酒精灯、接种环等实验方法（1）化脓性球菌常用标本：化脓部位脓液或分泌物、痰液、咽镊子、血液、脑脊液、泌尿道分泌液。根据病变部位，无菌采集，并置于无菌容器中。（2）分离程序1）用无菌接种环取材料少许，拇指推开皿盖。2）在点燃的酒精灯附近操作。先平行划线拇指端和食指端平皿直径的三分之一，旋转平皿 90 度，接种环灭菌，此为第一区。用无菌接种环从第一区带出细菌作为第二区的开始，再连续划线，大约划平皿面积的四分之一，再次灭菌接种环，再旋转 90 度，此区为第二区。第三区方法同第二区。第三区与第四区之间，接种环不灭菌直接划线划满平皿其他区域。3）在平皿底部用玻璃铅笔注明班级、姓名、日期等信息。置于 37 摄氏度温箱，皿底向上，培育 18 到 24 小时，备用。4）待血琼脂平板第四区上出现菌落，用无菌接种环挑取平皿中菌落在点燃的酒精灯附近接种在液体培育基，用于增菌并编号。5) 试管上用玻璃铅笔注明班级、姓名、日期等信息。置于 37 摄氏度温箱，皿底向上，培育 18 到 24 小时，备用。（3）鉴定程序 1）取各液体培育基中的菌液经过涂片→干燥→固定→染色（HE）→显微镜观察。根据染色结果分为：紫色的革兰染色阳性菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌红色的革兰染色阴性菌：淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌 2）对革兰染色阳性菌（葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌）进行溶血实验。根据结果分为： 完全透明溶血环：葡萄球菌、链球菌 草绿色溶血环：肺炎链球菌 3）对出现完全透明溶血环的细菌做过氧化氢酶实验，根据结果分为： 阳性：葡萄球菌 阴性：链球菌 4）对革兰染色阳性菌（淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌）进行分解麦芽糖实验，根据结果分为：不分解麦芽糖：淋病奈瑟菌分解麦芽糖产酸不产气：脑膜炎奈瑟菌（4）确诊程序根据鉴定程序得出的初步诊断，再进行确诊葡萄球菌的确诊① 血浆凝固酶试验，鉴定致病性葡萄球菌② 耐热核酸酶试验，用于检测金黄色葡萄球菌产生的耐热核酸酶③ 甘露醇发酵试验，金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇，该试验为阳性2）链球菌的确诊杆菌肽试验敏感试验，出现抑菌环者即可初步鉴定为 A 群链球菌胆盐溶菌试验，肺炎链球菌阳性，草绿色链球菌阴性血清学鉴定试验，检测链...
