石蜡切片的制作及HE染色件•石蜡切片制作流程•HE染色原理及步01石蜡切片制作流程取材01取材是石蜡切片制作的第一步,也是最关键的一步
取材时需要选择新鲜的、无病变的组织,并尽量保持组织的完整性
02取材的大小和厚度也会影响后续的切片制作,一般而言,组织块的大小应为2-3cm³,厚度在2-4mm之间
固定固定是为了防止组织自溶和腐败,保持组织细胞的形态和结构
常用的固定剂有甲醛、乙醇、丙酮等
固定时需要将组织放入适当的固定液中,固定时间一般为1-24小时,具体时间根据组织类型和大小而定
脱水脱水是为了去除组织中的水分,为后续的透明和浸蜡做准备
常用的脱水剂有乙醇、丙酮等
脱水过程中需要逐渐增加脱水剂的浓度,以避免组织过度收缩和变形
透明透明是为了使组织变得透明,以便更好地浸蜡和切片
常用的透明剂有二甲苯、氯仿等
透明时需要将组织放入适当的透明剂中,时间一般为10-30分钟,具体时间根据组织类型和大小而定
浸蜡浸蜡是为了将石蜡渗透到组织中,使组织变得硬固,以便切片
常用的石蜡有固体石蜡和液体石蜡
浸蜡时需要将组织放入适当的石蜡中,时间一般为1-2小时,具体时间根据组织类型和大小而定
包埋包埋是将组织用石蜡包裹起来,以便切片
包埋时需要将组织放入包埋盒中,并确保组织平整、无气泡
包埋盒需要用标签标记清楚,以便后续的切片和观察
切片切片是将包埋的组织切成薄片,以便观察
切片的厚度一般为5-10微米
切片时需要使用干净的切片机和刀片,以保证切片的完整性和质量
切好的切片需要用标签标记清楚,以便后续的观察和比较
02HE染色原理及步染色原理伊红染细胞质伊红染液中的成分能够与细胞质中的蛋白质结合,使细胞质呈现红色
苏木精染细胞核苏木精染液中的成分能够与细胞核内的核酸结合,使细胞核呈现蓝色
核质对比分明通过苏木精和伊红的染色,细胞核和细胞质在颜色上有明显的对比,便于观察组织结构和细胞形态