■染色前，所有细胞是透明■乙醇从G㈠菌体洗脱结细菌鉴定一、标本的处理：1、先按标准操作规程（SOP）对标本进行接种（一般种普通血平板和选择性麦康凯平板；真菌-沙保弱；链球菌-巧克力平板，CO2温箱；结核菌-罗氏;粪-SS）。一般细菌置于35°C培养24h；真菌置于30°C培养2、后将标本涂片，进行革兰染色，判断是革兰阴性或阳性，杆状，球状，短杆，球杆及弧状。革兰氏染色液在细菌学里最普遍的染色方法步骤-结晶紫着色後用碘增加染料与菌体结合■用复红液复染，革兰氏阴性菌呈粉红色，革兰氏阳性菌呈兰紫色原理：检査细菌细胞壁的渗透性革兰氏染色液2(ColorGram2)■特性o稳定化的碘液PVP(聚氯乙烯毗咯烷酮)可以防止因碘挥发而变质，同时也增强了媒染效果OT更容易分别G(+)及G(・)菌o高质量的结晶紫和复红，无沉淀。二、根据菌落形态，颜色，光滑与否，边缘，大小，是否有溶血环等初步判断所属菌属。不紧密外壁层｛透乙醇)薄内壁层肽聚糖三、生化鉴定（最主要的依据）腐生U祚血：肺炎链尊繭___草垛色链球繭免乳薙就0溶血：凉晦血匸化呼性琏球菌濡4葡药球曲~~二：口価球繭属增菌祥状杆朗属接状芽砲杆菌用芽拠杆菌属李斯特勵a丙酸杆菊厲乳杆繭展丹逵建阚属圈41临味常见華兰阳性萤的一般鉴定谕程备杆蔺科弯曲葡■核杆茶JA布ft«a悝鍬粗茵鳥谎樽曙加杆蘭土热扭弗阴西斯凿亠—肺炭军团菌嵐捷耶济羽菌吞日畋翁特曹老衆巴斯殆曲巴通傭属帕■!（弧菌科鄆尔利I定向实验（最重要两实验）杆微生物鉴定杆©接触酿革兰革兰球完幣的鉴左API微生物鉴定系统生理生化鉴定：根据微生物对各种生理条件（温度、pH、氧气、渗透压）、生化指标（唯一碳氮源、抗生素、酶、盐碱性）代谢反应进行分析，并将结果转化成软件可以识别的数据，进行聚类分析，与已知的参比菌株数据库进行比较，最终对未知菌进行鉴定的一种技术。生物梅里埃API试剂类型•API20E革兰氏阴性杆菌鉴定•API20NE非发酵菌鉴定•APISTAPH葡萄球菌及微球菌I常用5种•APISTREP链球菌鉴定•APICORYNE棒状杆菌’•API20CAUX酵母菌•API20A厌氧菌•APILISTERIA李斯特菌•APICAMPY弯曲菌属•APICH芽胞杆菌/乳酸杆菌革兰氏阳性杆菌分类□*口IMERIE：UX革兰氏FH性杆菌延长狀杆閑细水不透光關落短球朴菌丈怵积产芬抱申I菌20-26*匚有动力3厂U尤动力瓯小脫色含有异集颗粒slightdiscoloration{granulations)氈酸薦銮定API50CHL警抱苗螯定APi5QCHB1粹狀杆菌签定李球特歯签定APICoryneAPiListeria挑菌洛混匀及搂种API20E试条附加试条石腊油（容就;125mt）覆盖在指定小孔上加进摘是荊生化孔内PSlpetEes接种管悬浮液（容血5ml）JU於调帮液三、药敏试验（辅助鉴定及指导临床用药）最常用的纸片扩散法即K-B法。原理：该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。结果分为敏感S、耐药R及中介I。利用某些菌对某些药物天然耐药进而辅助鉴定结果正确与否，如嗜麦芽窄食单胞菌对亚胺培南（碳青霉烯类）天然耐药。菌落特征镜下形态G+cG+bG*cG-b/ZX生化反应药敏选择结合菌落特征结介菌落特征和镜下形态和镜下形态选拜相应主化选彝药敏试验反应、八*
