分解尿素的细菌的分离和计数—AlanVIP免费

课题课题22土壤中分解尿素的细菌的土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分离与计数一、课题背景一、课题背景11、尿素的利用、尿素的利用尿素尿素是一种重要的是一种重要的农业氮肥。农业氮肥。尿素尿素不能直不能直接接被农作物被农作物吸收。吸收。22、细菌利用尿素的原因、细菌利用尿素的原因CO(NHCO(NH22))脲酶脲酶+CO+CO22NHNH33+H+H22OO课题目的课题目的①①从土壤中分离出能够从土壤中分离出能够分解尿素的细菌分解尿素的细菌②②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌的细菌11、实例：、实例：原因：因为热泉温度原因：因为热泉温度7070～～808000CC，淘汰了绝大多，淘汰了绝大多数微生物只有数微生物只有TaqTaq细菌被筛选出来。细菌被筛选出来。PCR,PCR,此项技术要求使此项技术要求使用用耐高温（耐高温（939300CC）的）的DNADNA聚合酶。聚合酶。㈠㈠..筛选菌株筛选菌株筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件，筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长。同时抑制或阻止其他微生物生长。不加有机碳源不加氮源2.选择培养基的制作方法自养微生物酵母菌和霉菌固氮微生物加入青霉素加高浓度食盐金黄色葡萄球菌15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgSOMgSO4`4`7H7H22OO2.1g2.1gNaHNaH22POPO441.4g1.4gKHKH22POPO443.3.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：基：①①从物理性质看此培养基属于哪类？从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基固体培养基②②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：碳源：葡萄糖、尿素葡萄糖、尿素氮源：氮源：尿素尿素培养基的培养基的氮源为尿素氮源为尿素，只有能合成，只有能合成脲酶脲酶的微的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。44、培养基选择分解尿素的微生物的原理、培养基选择分解尿素的微生物的原理如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。筛选能够分解石油的微生物？1.使用选择培养基的目的是（）A.培养细菌B.培养真菌C.使需要的微生物大量繁殖D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素实践训练实践训练CD55、怎样证明此培养基具有选择性呢？、怎样证明此培养基具有选择性呢？以尿素为唯一氮源的培养基牛肉膏蛋白胨培养基是分离尿素细菌判断该培养基有无选择性实验组对照组培养基类型是否接种目的结果只生长尿素细菌生长多种微生物是微生物的培养与观察微生物的培养与观察鉴定：鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PHPH升高，指示剂将变红，说明该细菌能升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素够分解尿素。。测定饮水中大测定饮水中大肠杆菌肠杆菌数量的方法是将一定体积的水数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到伊红美蓝伊红美蓝培养培养基上培养，大肠杆菌基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色菌落呈现黑色，通过记述得出，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。水样中大肠杆菌的数量。大肠杆菌呈黑色中心大肠杆菌呈黑色中心,,有或无金属光泽有或无金属光泽大肠杆菌在伊大肠杆菌在伊红美蓝琼脂红美蓝琼脂(EMB)(EMB)上典型特征上典型特征11、显微镜直接计数、显微镜直接计数：：利用利用血球计数板血球计数板，在显微镜下计算一定容积里，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。样品...