血清α-淀粉酶活性测定(迈克)幻灯片VIP免费

血清血清α-α-淀粉酶（淀粉酶（AMSAMS或或AMYAMY）活）活性的测定性的测定Reagentforα-AmylaseTestReagentforα-AmylaseTest一、原理一、原理二、测定方法二、测定方法三、参考值三、参考值四、临床意义四、临床意义五、注意事项五、注意事项六、方法学评价六、方法学评价一、原理：一、原理：样品中样品中α-α-淀粉酶（淀粉酶（11，，4-α-D-4-α-D-葡萄糖水解酶，葡萄糖水解酶，又称淀粉内切酶，对又称淀粉内切酶，对11，，4-4-糖苷键连接的葡萄糖糖苷键连接的葡萄糖有特异性。）催化淀粉分子及糖原中的有特异性。）催化淀粉分子及糖原中的α-1α-1，，44葡萄糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有葡萄糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-α-11，，66糖苷键支链的糊精，在淀粉（已知浓度）糖苷键支链的糊精，在淀粉（已知浓度）充分的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀充分的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其颜色的深浅与未经酶促粉结合成蓝色复合物，其颜色的深浅与未经酶促反应的空白管比较，从而推算出淀粉酶的活力。反应的空白管比较，从而推算出淀粉酶的活力。注：注：11、生物界存在、生物界存在αα和和ββ两种淀粉酶，但人体两种淀粉酶，但人体内仅有内仅有α-α-淀粉酶。淀粉酶。22、淀粉酶分子量、淀粉酶分子量40000~50000,40000~50000,很易由肾很易由肾排出。排出。二、测定步骤：二、测定步骤：各管混匀，各管混匀，660nm660nm波长，以蒸馏水调零，波长，以蒸馏水调零，测定各管吸光度值。测定各管吸光度值。试剂测定（试剂测定（UU））空白（空白（BB））样品（样品（mlml））0.020.02——蒸馏水（蒸馏水（mlml）—）—0.020.02试剂试剂R1R1（（mlml））1.001.001.001.00各管混匀，置各管混匀，置3737度水浴度水浴7.57.5分分钟。钟。试剂试剂R2R2（（mlml））1.001.001.001.00蒸馏水（蒸馏水（mlml））5.005.005.005.0022、计算：、计算：注：淀粉浓度注：淀粉浓度0.4g/L0.4g/L样品样品AMYAMY活力（苏氏单位）活力（苏氏单位）==样品样品AMYAMY活力（苏氏单位活力（苏氏单位)=)=02.01005.71554.0BUBAAA800BUBAAA注解注解①①0.4——0.4——淀粉浓度淀粉浓度②②5.0——15.0——1单位定义消耗淀粉单位定义消耗淀粉mgmg数数③③15——115——1单位定义反应时间单位定义反应时间④④7.5——7.5——酶的实际作用时间酶的实际作用时间⑤⑤100——1100——1单位定义用血清单位定义用血清⑥⑥0.02——0.02——样品取量样品取量33、、AMYAMY活性单位定义：活性单位定义：100ml100ml血清中的淀粉酶在血清中的淀粉酶在37℃37℃，，1515分钟水解分钟水解5mg5mg淀粉为淀粉为11个单位。个单位。44、半自动生化仪的使用、半自动生化仪的使用①①测定法：终点法测定法：终点法②②温度：温度：37℃37℃③③波长：波长：623nm623nm④④吸量：吸量：1000μl1000μl⑤⑤参考范围：参考范围：60~180U60~180U⑥⑥线性范围：线性范围：0~400U0~400U三、参考值：三、参考值：血清：血清：60~180U60~180U苏氏单位苏氏单位尿液：尿液：100~1200U100~1200U苏氏单位苏氏单位四、临床意义：四、临床意义：淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌，淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌，肺、肝、甲状腺、脂肪等组织亦含有此酶。肺、肝、甲状腺、脂肪等组织亦含有此酶。血清淀粉酶测定主要用于急性胰腺炎的诊血清淀粉酶测定主要用于急性胰腺炎的诊断。一般于发病后断。一般于发病后6~12h6~12h开始升高，开始升高，12~12~24h24h达峰值，达峰值，2~5d2~5d恢复正常，因此血清恢复正常，因此血清淀粉酶活性显著升高对急性胰腺炎的早期淀粉酶活性显著升高对急性胰腺炎的早期诊断价值较大。淀粉酶可通过肾小球滤过，诊断价值较大。淀粉酶可通过肾小球滤过，尿淀粉酶于发病后尿淀粉酶于发病后12~24h12~24h开始升高，持开始升高，持续时间长，下降比血清淀粉酶慢，故胰腺续时间长，下降比血清淀粉酶慢，故胰腺炎后期测尿淀粉酶更有价值。炎后期测尿淀粉酶更有价值。慢性胰腺炎、胰腺癌、急性阑慢性胰腺炎...