血清(浆)脂类及脂蛋白测定VIP免费

血清（浆）脂类及脂蛋白测定——董雷鸣血脂的组成：甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯)磷脂胆固醇和胆固醇酯非酯化脂肪酸（游离脂肪酸）等血脂的运输形式—脂蛋白1、定义：指血浆脂质与载脂蛋白组成的可溶性的生物大分子。磷脂胆固醇载脂蛋白甘油三酯胆固醇酯2、结构：脂蛋白微粒表面核心3、分类(1)按密度不同HDLLDLIDLVLDLCM(2)按电泳时区带的泳动位置不同CMHDLVLDLLDLCMβ-LP前β-LPα-LP＋α-LP前β-LPβ-LPCM临床血脂测定的常见项目：实验51：磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）提取HDL测定胆固醇实验原理：超速离心法层析法电泳法☆沉淀法提取HDL的方法：沉淀法原理：ApoB+多阴离子化合物沉淀↓硫酸葡聚糖--Mg2+肝素--Mn2+磷钨酸--Mg2+多阴离子（polyanion）化合物过氧化物酶胆固醇+O2胆甾烯酮+H2O2H2O2+酚+4-氨基安替比林亚胺醌+H2O胆固醇测定（酶法）：试剂：沉淀剂酶试剂参考血清（TC测定用的定值血清）操作步骤：取血清和沉淀剂各200μl，充分混匀，置室温放置10min后，2500r/min，15min，吸取上清液按表进行操作。1、提取HDL加入物(μl)空白管标准管测定管上清液——50参考血清—50—蒸馏水50——酶试剂200020002000混匀，37℃水浴15min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。2、测定胆固醇计算：参考值：HDL-C(mmol/L)测定管吸光度标准管吸光度×=定值血清胆固醇浓度5.170.9~2.0mmol/L2注意事项：1、血清标本要及时测定——（在室温条件下，各型脂蛋白之间会发生脂质交换）；——（游离的胆固醇会不断酯化）。2、离心过程中防止温度过高（室温15~25℃），离心后放置时间不能过长。——（温度过高使沉淀不完全）。临床意义：具有抗动脉粥样硬化作用，是冠心病的保护因素。磷酸甘油氧化法测定血清甘油三酯（TG）实验49：甘油三酯(TG)的结构：甘油三酯测定的方法：化学法酶法化学法（KOH）（过碘酸）皂化氧化抽提甘油甲醛显色甘油三酯甘油甲醛变色酸紫红色甘油三酯3-磷酸甘油+ADP+ATPO2、H2O+磷酸二羟丙酮+H2O2甘油+脂肪酸+酚、4-氨基安替比亚胺醌+H2OLPLGKGPOPOD☆酶法（磷酸甘油氧化酶法）试剂：酶试剂2.26mmol/L的三油酸甘油酯标准液操作：加入物(μl)空白管标准管(×2)测定管(×2)上清液——20参考血清—20—酶试剂20002000200037℃水浴10min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。计算：TG(mmol/L)测定管吸光度标准管吸光度×=标准液浓度参考值：0.56~1.70mmol/L2.26mmol/L临床意义：增高:与动脉粥样硬化关系密切、家族性的脂代谢紊乱、糖尿病等。降低:营养不良、消化吸收综合征、消耗性疾病等。注意事项：标本：标本要求是餐后12-14h的空腹血液——（血清TG易受饮食影响）。标本存放不宜超过3天——（避免TG水解而释放出甘油）。试剂：酶试剂应4℃避光保存，出现红色不可再用。免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白A1和载脂蛋白B实验53：抗原抗原抗体复合物抗体+ApoA1ApoBApoA1抗体ApoB抗体比色原理：ApoA1与高脂血症、冠心病呈负相关；ApoB与高脂血症、冠心病呈正相关。临床意义：