药物的镇痛作用药物的镇痛作用热板法化学刺激法右江民族医学院药理教研室右江民族医学院药理教研室一、热板法【实验原理与目的】小鼠的足底无毛,皮肤裸露,在温度55±0.5℃的金属板上产生疼痛反应,表现为舔后足,踢后腿等现象。罗通定可提高痛阈,推迟小鼠疼痛出现时间。学习热板镇痛实验方法,观察罗通定的镇痛作用。【实验动物】雌性小白鼠,体重20±2g。【器材药物】智能热板仪,电子称,鼠罩,1ml注射器,0.2%罗通定溶液、生理盐水、苦味酸溶液。【实验方法】⒈将热板仪调至55℃。⒉筛选并测定正常痛阈将小鼠放入热板仪内,密切观察小鼠反应,以舔后足为痛觉指标。记录痛阈时间值(从小鼠放入热板镇痛仪到出现舔后足)。每只小鼠测痛阈2次(间隔5min),取其平均值为正常痛阈值(药前痛阈s)。凡在30s内不舔后足或痛阈小于5s者弃去,每实验小组筛选合格小鼠8只,并用苦味酸标记编号为1-8。⒊给药给药组1、2、3、4号鼠腹腔注射0.2%罗通定溶液0.1ml/10g,对照组5、6、7、8号鼠腹腔注射生理盐水0.1ml/10g并记录给药时间。4.测痛阈变化值给药后15、30min各测痛阈1次,对60s内不舔足的小鼠应立即取出来,痛阈按60s计算。【实验结果】⒈综合全部实验室数据,计算出各组痛阈的平均值(X)填入下表组别给药前平均给药后平均痛阈值镇痛百分率(%)痛阈值15min30min15min30min对照组实验组药后痛阈值均数-药前痛阈值均数⒉药物镇痛阈提高百分率(P)=×100%药前痛阈值均数【注意事项】⒈本实验应选用雌性小鼠,雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂,与热板接触影响实验结果。⒉室温应控制在13±18℃,此温度小鼠对痛反应较稳定。⒊正常痛阈≥30s、≤10s以及喜跳跃的小鼠均应弃用。⒋测痛阈时若60s仍无反应,应立即取出小鼠,以免烫伤足趾,且痛阈按60s计。二、化学刺激法(扭体法)【实验原理与目的】腹膜有广泛的感觉神经分布,把醋酸等化学刺激物注入腹腔,可使小鼠很快产生疼痛反应,表现为腹部两侧内凹、躯体扭曲和后肢伸展,统称为扭体反应。罗通定可明显抑制扭体反应的发生,从而证明其镇痛作用。学习化学刺激法镇痛实验方法,观察罗通定的镇痛作用。【实验动物】小白鼠,雌雄不拘,体重20±2g。【实验器材与药品】电子称、鼠罩、1ml注射器、0.2%罗通定溶液、0.6%醋酸溶液、生理盐水,苦味酸溶液。【实验方法】⒈取小白鼠4只,称重。⒉观察正常活动。⒊给药:给药组1、2、3、4号小白鼠腹腔注射0.2%罗通定0.1ml/10g,对照组5、6、7、8号小白鼠腹腔注射生理盐水0.1ml/10g,记录给药时间。⒋药后20min,各组小鼠均腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g,观察20min内各组出现扭体鼠数和扭体次数。【结果】⒈综合全实验室结果填入下表组别药物剂量鼠数扭体鼠数扭体次数镇痛百分率(%)给药组20对照组20⒉计算镇痛百分率(P)生理盐水组扭体次数-给药组扭体次数P=×100%生理盐水组扭体次数【注意事项】⒈醋酸溶液宜新鲜配制,也可用新配制的0.05%酒石酸锑钾溶液。⒉室温不能低于10℃,否则不易发生扭体反应。⒊给药组比对照组减少扭体发生率50%以上才能认为有镇痛效力。⒋小鼠体重轻,扭体反应发生率低。