高效毛细管电泳法在中药分析中的应用VIP专享VIP免费

·44·中国兽药杂志2003，37(10)：44～46，32／何绮霞高效毛细管电泳法在中药分析中的应用何绮霞(广东省兽药与饲料监察总所，广东广州510230)[收稿日期]2003—01-08[文献标识码]B[文章编号]1002—1280(2003)10—0O44—04[中图分类号]11284．1[摘要]简要介绍了高效毛细管电泳的六种主要分离模式及其在分析中药材的生物碱、黄酮、有机酸、香豆素类、醌类、苷类等成分和中药复方制剂中的应用，并分析了该技术的发展前景。[关键词]高效毛细管电泳；中药分析中药成分复杂，品质受各种因素制约。中药材基源、产地、栽培方法、生长环境、采收季节及加工处理过程不同，对中药产品的质量影响很大，因此如何保证药品质量、提高药物疗效是急待解决的问题。随着科学技术的进步，各种仪器的发展，用于分离和分析中草药的仪器日益增多，其中高效毛细管电泳(HPCE)技术是近几年分析化学中发展最为迅速的领域之一_lJ。现代毛细管电泳技术由Jorgenson和Lukacs于1981年提出，该方法效率高(每1m理论塔板数达10一10。)；分析时间短；柱上检测无死体积；需要样品体积很小(1—50nL的进样体积)；操作条件选择和操作模式切换相对容易，便于开发新的分析方法；一般在水相介质中进行分离，有机废液可忽略；仪器易于自动化。因此逐步应用于中草药分析、鉴定中。1HPCE的分类及其基本原理。电泳是导电物质在电场中受吸引或排斥而引起的迁移运动，利用这种差速移动作为分离的模式称为电泳技术。HPCE主要有六种分离模式。1．1毛细管区带电泳(CZE)CZE是最常用的一种毛细管电泳分离模式。它是通过在充满电解质溶液的毛细管中，不同质荷比的组分在电场作用下迁移速度的不同而进行分离j。1．2毛细管胶束电动色谱(MEKC)MEKC是在缓冲液体系中加人表面活性剂，当表面活性剂浓度大于其临界胶束浓度时，则在运行缓冲液中形成胶束。因此，在MEKC体系中实际上存在着类似于色谱的两相：一个是流动的水相，另一个是相对固定的胶束相，溶质在这两相之间分配，并由于其在胶束中不同的分配差异而实现分离。1．3毛细管凝胶电泳(CGE)及无胶筛分(NGS)CGE是分离效率最高的一种CE模式(N>10)。它是一种把普通凝胶电泳移到毛细管中进行的凝胶电泳。1．4毛细管等电聚焦(CIEF)CIEF是依据样品组分(主要是两性化合物)的等电点不同而实现分离的一种技术。即有一个pH的位置梯度，那么有可能使有不同等电点的分子分别聚焦在不同的位置上，不作迁移而彼此分离，这就是所谓的等电聚焦分离过程。1．5毛细管等速电泳(CITP)与CZE技术一样，C1TP的分离原理也是依据样品组分电泳淌度的不同来进行分离。1．6毛细管电色谱(CEC)CEC是在毛细管中填充了液相色谱用的固定相载体，使被分离组分在这些固定相载体上进行保留和分配，它与液相色谱技术的区别之处在于前者是以电渗力为驱动力，而后者是以压力为驱动力。2HPCE分析中草药的优越性HPCE用于分析中草药，具有以下优势：①分离模式多，适合于中草药中存在的各类物质的分析。②简化对样品前处理的要求；③分析时间一般比何绮霞(1963年～)，女，副主任药师，主要从事中、西兽药的质量标准研究。维普资讯http://www.cqvip.com2003，37(10)：44～46，32／何绮霞中国兽药杂志·45·HPLC短；④由于柱效高，有可能使同一个分离条件适合多种样品中多组分的分析；⑤HPCE所采用的毛细管柱易于全面清洗，不必担心柱污染而报废；⑥所用的化学试剂少，价廉，分析成本低，特别适合于我国国情。3HPCE在中药分析中的应用对中药及其制剂的成分分析，目前较常用的方法为CZE和MEKC。已有关于芍药、人参、黄芩、黄连、黄柏、麻黄、大黄、甘草等中药材以及葛根汤、小柴胡汤、加味逍遥散等几十种中药复方及其制剂中某些药效成分分析的报道。3．1生物碱生物碱在自然界中分布很广，一般都具有强烈的生理活性，有的甚至具有很强的毒剧作用，如乌头中所含的乌头碱，因此建立生物碱的分析方法十分必要和重要。在中草药的毛细管电泳分析中，它是被研究得最多的一类标志性化合物。由于生物碱在低pH下荷正电，所以生物碱常常能在pH低于7的缓冲溶液中得到分离分析。对于生物碱的分析，多采用CZE模式，如麻黄及其制剂中的6种麻黄碱的毛细管电...