猪I型与II型干扰素的克隆-生物谷-生物医药门户VIP免费

猪 I 型与 II 型干扰素的克隆、表达及抗病毒活性比较陈雪梅, 薛清华, 祝荣格, 付显华, 杨利敏, 孙蕾, 刘文军中国科学院病原微生物及免疫学重点实验室 中国科学院微生物研究所分子病毒中心, 北京 100101摘 要: 干扰素(IFN)是由多种细胞受病毒感染或其他生物诱导剂刺激而产生的天然蛋白质, 主要功能为抗病毒增殖、调节免疫反应和激活免疫细胞等。本研究克隆并测序了猪干扰素(PoIFN)、、及基因。构建原核表达载体 pET-His/PoIFN-、pET-His/PoIFN-、pET-His/PoIFN-和 pET-His/PoIFN-, 转化大肠杆菌 Rosetta(DE3)进行表达, 经纯化、复 性 得 到 具 有 生 物 学 活 性 的 蛋 白 。 用 细 胞 病 变 抑 制 法 在 Marc-145/PRRSV 、 Marc-145/VSV 、 PK-15/VSV 、 Vero/VSV、MDBK/VSV 系统上进行抗病毒活性测定, 结果表明猪和融合干扰素有较为显著的抗病毒活性, 抗 PRRSV活性高达 108 U/mg; 猪干扰素活性效价约为干扰素的 1/2 到 1/3; 猪干扰素几乎未检测到抗病毒活性, 需进一步验证。本研究对干扰素在抗病毒、提高机体免疫方面的应用提供了理论依据。关键词: 猪干扰素, 抗病毒活性Comparison of antiviral activities of porcine interferon type I and type IIXuemei Chen, Qinghua Xue, Rongge Zhu, Xianhua Fu, Limin Yang, Lei Sun, and Wenjun LiuChinese Academy of Sciences Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Center for Molecular Virology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, ChinaAbstract: Interferons (IFNs) are natural proteins produced by wide variety of cells in response to viral infection or other biological inducers, and they execute diversified functions as antiviral defense, immune activation and cell growth regulation. Four genes encoding porcine interferons (PoIFN), PoIFN-α, PoIFN-γ, PoIFN-αγ or PoIFN-ω, were cloned and sequenced. The four types of porcine interferon genes were subcloned into the pET-His vector, and expressed in Escherichia coli Rosetta (DE3). The recombinant...