溶菌酶检验标准

1术语和定义溶菌酶酶活性单位：在 25℃、 pH 值为的条件下，于450nm 处每分钟引起溶酶小球菌体（Micrococcus Lysodeiktidus）溶液吸光度下降所需要的酶量为一个酶活性单位U。本定义适合“比浊法”。溶菌酶效价：溶菌酶在一定浓度范围内，其对数计量与抑菌圈直径（面积）呈对数关系，通过检测其对微生物的抑制作用，比较标准品与样品产生抑菌圈的大小，计算出样品的效价，单位为 u。本定义适合“管碟法”。2技术要求2.1外观和性状要求粉酶为白色或微黄色的结晶或无定形粉末。2.2技术指标4.2.1粉酶水分含量：≤ 12%。4.2.2粉酶粒度： 420μ m孔径分析筛筛上物≤ 4%。4.2.3粉酶炽灼残渣：≤ %。4.2.4酶活（效价）指标表 1 产品成分分析保证值项目指标粉状 50 型溶菌酶酶活性（效价） ，≥U/g（ u）5000004.2.5卫生指标符合 GB 13078 和 NY/T 722 的有关规定。3试验方法本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682 中规定的三级水，所用试液中的标准溶液，在没有注明其他要求时均要求按GB/T 601 ，GB/T 602 制备。3.1外观的测定取样品少许放入烧杯，下衬白纸进行目测。3.2粉酶水分的测定按 GB/T 6435 规定进行检测。3.3粉酶粒度的测定按 GB/T 5917 规定进行检测。3.4粉酶炽灼残渣的测定按《中国兽药典》规定进行检测。3.5卫生指标的测定按饲料卫生标准GB13078 和 NY/T 722 规定的方法进行。3.6溶菌酶酶活性（效价） 的测定溶菌酶微生物测定法系在适宜条件下，通过检测溶菌酶对微生物的抑制作用，计算出溶菌酶活性（效价）的方法。依据试验设计原理不同，可分为比浊法和琼脂扩散法（即管碟法）。3.6.1试剂和溶液5.6.1.1溶酶小球菌（ Micrococcus Lysodeiktidus）将溶酶小球菌接种于固体培养基上，置37℃培养48 小时，用无菌水将菌体洗下，用纱布滤过，滤液离心后，倾去上层清液，用水洗涤菌体数次，然后用少量水悬浮，冰冻干燥，得淡黄色粉末，供测定用，保存一年。使用时， 在营养琼脂斜面上活化，传代培养，工作用菌种不超过5 代，斜面菌种从培养好到使用时间，最长不超过2 个月。并将培养好的斜面菌种，放置4℃冰箱保存。制备的菌悬液可以使用一周，不用时放置4℃冰箱保存。5.6.1.2磷酸缓冲液称取磷酸二氢钠（）11.7g, 磷酸氢二钠（）7.86g ，加 900mL 水溶解 , 调 pH 值至，定容至1000mL。5.6.1.310％氢氧化钠溶液5.6.1.41％硫酸铜溶液5.6.1.530%三氯醋酸5.6.1.6...