Gateway™ 技术提供以下可能： 通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 将您的基因转入到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外，细菌，酵母，昆虫，或哺乳动物――分析表达 一种更好的克隆方法 Gateway™技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统（图1）。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤，而同时典型的克隆效率高达95％或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时，还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway™也有助于进行带不同数目纯化和检测标签的表达。 Gateway™利用了位点特异重组，所以在构建入门载体后，不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆，就可以多次使用它，转移您感兴趣的基因到Gateway™改造过的 的各种表达载体（目的载体）。 此外，由于在重组时D N A 片段的阅读框和方向保持不变，因而您不必再为新的表达克隆的测序担心。在使用每一种新的表达系统时，将会节省您更多的时间。 图1-Gateway™技术的灵活性 *目的基因克隆进入门载体后， 可以同时转移目的基因到多个目的载体。 一种强大而可靠的技术 Gateway™技术是克隆和亚克隆DNA 序列的一项新颖的通用系统，便于功能基因的分析和蛋白质的表达。一旦进入这个多功能的操作系统，DNA 片段可以通过位点特异的重组在载体之间转移。 Gateway™技术是基于已研究的非常清楚的λ 嗜菌体位点特异重组系统（attB x attP → attL x attR）。BP 和 LR 两个反应就构成了 Gateway™技术（表 1 和图2）。BP 反应利用一个attB DNA 片段或表达克隆和一个attP 供体载体之间的重组反应，创建一个入门克隆。LR 反应是一个attL 入门克隆和一个attR 目的载体之间的重组反应。LR 反应用来在在平行的反应中转移目的序列到一个或更多个目的载体。 Gateway™ 技术也利用了 ccdB 选择方法，确保高效率的分离重组克隆。典型的效率是＞95％。需要了解更多的有关 ccdB 的信息，请参考术语表。 表1-反应和术语总结 反应 反应位点 产物 产物结构 BP 反应 attB x attP 入门克隆 attL1-基因-attL2 LR 反应 attL x attR 表达克隆 attB1-基因-attB2 完成构建 Gateway™ 表达克隆仅需两步（图 2）： 1. 创建入门克隆，通过 PCR 或传统的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。 2. 混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体及Gateway™ LR Clonase™ 酶，...
