微生物学大实验 实验题目：土壤微生物的分离纯化与鉴定 一． 实验目的： 1.巩固本学期所学的所有微生物实验操作技能。 2.再次强调无菌操作概念。 3.初步学习微生物鉴定纯化的方法和思路。 4.学会应用相关手册对微生物进行分类。 二． 实验原理： 1. 培养基的制备、消毒与灭菌： 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多。但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。不同微生物对 pH 要求不一样，霉菌和酵母的培养基的 pH 一般是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基的 pH 一般为中性或微碱性的 ( 嗜碱细菌和嗜酸细菌例外 ) 。所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的 pH 调到合适的范围。 此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌，如果来不及灭菌，应暂存冰箱 内 ，以防 止 其 中的微生物生长繁殖而消耗 养分和改 变 培养的酸碱度 所带 来不利 的影 响 。 2. 微生物的分离与纯化： 自然界中各种微生物混 杂 生活 在一起 ，要研究某 种微生物的特 性，首 先 须使 该 微生物处 于纯培养状 态 。从 混 杂 的微生物群 体 中获 得 只 含有某 一株 微生物的过 程 称 为微生物的分离与纯化。土 壤 是微生物生活 的大 本营，所含微生物无论 是数 量 还 是种类都是及其 丰 富 的。因此，土 壤 是微生物多样性的重 要场 所，是发 掘 微生物资 源的重 要基地 ，人们 可 以从 中分离到很多有价 值 的菌株 。本实验将采 用平 板 划 线分离法。 3. 平 板 分离技术 与活 菌计 数 ： 值 得 指 出 的是从 微生物群 体 中经 分离、生长在平 板 上 的单 个 菌落 并 不一定保证 是纯培养。因此，纯培养的确 定除 观 察 其 菌落 特 征 外，还 要结 合显 微镜 检 测 个 体 形 态特 征 等综 合考 虑 。有些 微生物的纯培养要经 过 一系 列 的分离与纯化过 程 和多种特 征鉴定方能得到。从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。 平板分离法主要有：（1）平板划线分离法，（2）...
