课题 1 微生物的分离和纯培养教材内容解读要点 1培养基（1）培养基按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。（2）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种营养物质。满足微生物生长还需要适宜的 pH、氧气的要求（根据微生物的需求提供有氧或无氧环境）、特殊营养物质等。碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如 CO2、NaHCO3 等无机碳源；糖类、蛋白质、脂肪等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如 N2、NH3、NO3-、NH4+、蛋白质、氨基酸等。只有固氮微生物才能利用 N2。要点 2无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：① 对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。② 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。③ 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④ 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。（2）消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、红外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。要点 3制作牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。（2）倒平板操作的步骤：① 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。② 右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。③ 用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约 10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。④ 等待平板冷却凝固，大约需 5～10min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。要点 4纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。（2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培...
