唾液淀粉酶最适ph值测定

唾液淀粉酶最适 PH 值测定摘 要:酶就是具有高效催化能力得生物大分子物质,底物浓度相同时,酶得催化活性主要受温度、pH 等因素影响。温度一定时,酶活力最高时得 pH 值为该酶在该温度得最适 pH。在不同 pH 值下。通过测定淀粉酶水解底物得程度,测定唾液淀粉酶得最适 pH 值。在不同 pH 条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘液反应呈现颜色反应,通过对颜色得观察与分光光度计测量产物吸光值得大小。可知底物得反应程度,从而可以推断出唾液淀粉酶得最适 pH。关键词:唾液淀粉酶 最适 pH 吸光值前 言:酶就是由生物体内活细胞产生得一种生物催化剂,细胞新陈代谢包括得所有化学反应几乎都就是在酶得催化下进行得。酶催化化学反应得能力称为酶活性。酶得化学本质就是蛋白质,它具有两性电解质得性质,在一定溶液中可以发生解离作用。酶无论在生活中还就是在医学领域都具讨论意义,酶得各种特性被广泛应用于各个领域。影响酶反应活力得因素很多,主要包括 pH、温度、酶浓度、金属离子浓度、抑制剂等。酶在水溶液环境中得解离状态与行为,都受到H+得影响,酶活性中心功能基团解离状态将直接影响到酶得活化以及酶与底物得亲与力,其会随着溶液 pH 得改变而改变。所以,溶液 pH 对酶催化反应得速度有明显得影响。在某-pH 值时,酶活性达到最大,这一数值称为酶得最适 pH。不同得酶得最适 pH 不相同。淀粉经唾液中得淀粉酶水解,生成糊精与麦芽糖,在底物过量得条件下,反应后加入碘液与未被水解得淀粉结合生成蓝色复合物,其颜色得深浅与空白管颜色得差值与淀粉酶得活力成正比。用单位时间剩余淀粉量与碘反应产生得蓝色在 660 nm 处得吸光度值来表示淀粉酶得活性。在温度、酶浓度相同得情况下,酶活力在最适 pH 得情况下达到最大。一、实验步骤:1、不同 pH 缓冲液得配制配制各个 pH 得缓冲液 10ml,选择 pH 值从 5、8-7、6,间隔 0、2。表 1 磷酸缓冲液配制表 用量 (mL)编号pH0、2mol/LNa2HPO4(ml)0、2mol/LNaH2PO4(ml)蒸馏水16、00、624、385、0026、20、934、075、0036、41、333、675、0046、61、883、125、0056、82、452、555、0067、03、051、955、0077、23、601、405、002、唾液得猎取先漱口 1-2 次,然后含一大口水约 1min,期间做咀嚼运动,然后收集至洁净得烧杯中。3、淀粉用量得确定如表 2,设置实验组与空白对比组。表 2 实验组与空白对比组设置表 用量 (mL)实验组12345空白对比7、0 pH 缓冲液0、90、90、90、90、90、9...