染菌的检查、原因分析和防止措施 染菌的检查、原因分析和防止措施 1.染菌的检查与判断 在发酵过程中对杂菌污染的及早发现，及时处理，是免除染菌造成严重损失的重要问题。因此，要求有确切、迅速的方法来检出杂菌的污染，目前常用方法主要有以下几种： （1）显微镜检查 通常用革兰氏染色法，染色后在高倍显微镜下观察。对霉菌、酵母发酵，先用低倍显微镜观察生产菌的特征，然后再用高倍显微镜观察有否染菌存在，根据生产菌与杂菌的特征区别，判断是否染菌。必要时，可进行芽孢和鞭毛染色。 （2）平板划线培养或斜面培养检查法 先将经灭菌的固体培养基倒入灭菌的平板中置培养箱摄氏 37 度，保温24h 检查无菌即可使用。将需要检查的样品，在无菌平板上划线，分别置摄氏 37 度、摄氏 27 度培养，以适应嗜中菌和低温菌的生长，一般在8h 后即可观察。 噬菌体检查可采用双层平板培养法，底层同为肉汁琼脂培养基，上层减少琼脂用量。先将灭菌的底层培养基熔后倒平板，凝固后，将上层培养基熔解并 保持 摄氏 40 度，加 生产菌作 为指 示 菌和待 检样品混合 后迅速倒在底层平板上，置培养箱保温培养，经 12~20h培养，观察有无噬菌斑 。 培养基（PH7.0 ） 葡 萄 糖 （% ）牛 肉膏 （% ）蛋 白 胨 （% ）氯 化 钠 （% ）琼脂（% ） 上层 0.5 1.0 1.0 0.5 1.0 下层 0.5 1.0 1.0 0.5 2.0 （3）肉汤 培养检查法 染 菌 的 检 查 、 原 因 分 析 和 防 止 措 施 --第 1页染 菌 的 检 查 、 原 因 分 析 和 防 止 措 施 --第 1页将需要检查样品接入经灭菌并经过检查无菌的肉汤培养基中，放置摄氏37 度和摄氏27 度分别培养24h ，进行观察，并取样镜检。此法常用于检查培养基和无菌空气是否带菌，也可用于噬菌体检查，此时使用生产菌作为指示菌。 葡萄糖酚红肉汤培养基：牛肉膏0.3% ，葡萄糖0.5% ，氯化钠0.5% ，蛋白胨0.8% ，1% 酚红溶液0.4% ，PH7.2 。 用以上的检查方法检查未发现污染，还不能肯定未被污染。 除以上方法外，还可以从发酵过程的异常现象来判断是否染菌，如溶解氧、PH 值、排气中CO2 含量和菌体酶活力等变化来判断。 2.发酵染菌率和染菌原因分析 （1）发酵染菌率 发酵的总染菌率是指一年内发酵染菌的批数与总投料发酵批数之比。 发酵染菌是在发酵罐中发生的染菌率，包括染菌后被挽救不了导致倒罐的批数，但种子罐培养的染菌不接...
