培养基母液的配制方法VIP免费

培养基母液的配制方法 一、实验目的 1.了解无菌操作 2.掌握培养基母液的配制方法 二、实验原理 配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。 三、实验器材和药品 器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。药品：NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、 MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、 ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、 CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B6)、盐酸硫胺素 (维生素 B1)、甘氨酸。 四、实验步骤 1、大量元素母液的配制 各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。 表1 MS培养基大量元素母液制备 序号 药品名称 培养基浓度（mg/L） 扩大10称量(mg) 1 NH4NO3 1650 16500 2 KNO3 1900 19000 3 CaCl2·2H2O 440 4400 4 MgSO4·7H2O 370 3700 5 KH2PO4 170 1700 注意： (1) 配制大量元素母液时，某些无机成分如 Ca2+、SO42－、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。特别应将 Ca2+、SO42一、Mg 2十和 H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。 (2)CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解 CaCl2·2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的 CO2，以防沉淀。另外，CaCl2·2H2O放入沸水中易沸腾，操作时要防止其溢出。 2、微量元素母液的配制 MS培养基的微量元素无机盐由 7种化合物（除 Fe ）组成。微量元素用量较少，特别是 CuSO4·5H2O、 CoCl2·6H2O ，因此在配制中分微量Ⅰ、Ⅱ配制。按照表 2，表 3配方，用电光天平称量，其它同大量元素。配制培养基时，每配制 1L培养基，取微量Ⅰ10ml，微量Ⅱ0.1ml。 表 2 MS培养基微量Ⅰ的配制 序号 化合物名称 培养基浓度（mg/L） 扩大 100倍称量(mg) 1 MnSO4·4H2O 22.3 2230 2 ZnSO4·7H2O ...