高中生物选修三基因工程|高中生物基因工程知识点归纳【--高考祝福语】关于基因工程的生物内容属于选修三的生物课本，虽然是选修知识，但也是平时高考会考察的一个重点知识，你了解基因工程吗?下面是百分网为大家整理的高中生物重要的知识，希望对大家有用!高中生物基因工程知识基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_3.PCR 技术扩增目的基因(1)原理：DNA 双链复制⑵ 过程：第一步：加热至 90〜95°CDNA 解链;第二步：冷却到 55〜60C,引物结合到互补 DNA 链;第三步：加热至 70-75C，热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因(1)启动子：是一段有特殊结构的 DNA 片段，位于基因的首端，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出 mRNA，最终获得所需的蛋白质。(2)终止子：也是一段有特殊结构的 DNA 片段，位于基因的尾端。(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞_1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用 Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞,再将重组表达载体 DNA 分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA 分子，完成转化过程。3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1.首先要检测转基因生物的染色体 DNA 上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA 分子杂交技术。2.其次还要检测目的基因是否转录出了 mRNA,方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA 杂交。3.最后检测目...
