工作中[9～11]。本文了基于高压制备液相的多维色谱系统的基本原理和关键技术，并综述了其在中药分离纯化中的应用。2 高压制备液相系统的多维色谱技术由于天然产物、中药及代谢产物等样品的复杂性，传统的一维色谱在一次运行中，常常受峰容量（Peak capacity）和分辨率的限制，不能满足分析和分离的需要[12]。根据Giddings 等[13]的讨论，多维分离模式的峰容量应为其构成的各个一维分离模式的峰容量的乘积，这使得在一定时间内从色谱柱中洗脱出来并达到一定分离度的色谱峰的数量大大增加，多维色谱（Multidimensional chromatography ， MDC）技术也因此而得到了迅速进展[14]。高压制备液相的多维色谱是在高压制备液相色谱的基础上，通过阀门控制或离线再进样操作，结合其它分离机制或分离模式的色谱技术而形成的一项能对复杂样品实现高容量分离纯化的新技术，可实现样品不同组分在一次操作中的多次分离。它不仅能提高色谱体系的峰容量和正交性[7，15]，还能降低色谱峰之间峰重叠[16]，使得多组分样品、含量差异大样品，性质相似样品的分离制备成为可能。2.1 分离模式根据两维间洗脱馏分是否直接进行连续性分离，可将多维色谱技术分为离线模式和在线模式。离线模式[17]指洗脱馏分不直接进行连续性分离，这种操作模式溶剂选择性广，对仪器要求不高，峰容量大[18]，但步骤繁多，自动程度不高，耗时耗力，样品损失较多。对应于离线模式，在线模式是通过仪器系统自身对样品进行捕获、富集，最终实现多次分离的模式[19]，这种模式自动化程度高，连续性强，但对溶剂的兼容性要求较高。二维以上的多维制备色谱通常结合了离线模式与在线模式，这种多维制备色谱更适用于性质相近、结构相似的组分的分离纯化。然而，多维的分离操作会导致样品的损失量增大，因此在分离分析过程中需要确保足够的样品量。2.2 制备色谱柱与分析型色谱柱相比，制备型色谱柱的上样量和流速都可以提高 3 至 4 个数量级，甚至更高。制备色谱虽然不是分析色谱的简单放大，但是两者可以通过线性放大系数关联起来。线性放大的基本假设是分析色谱系统和制备色谱系统的化学性质、传质过程都保持不变，而进样量、流量、收集体积等乘以线性放大系数，线性放大系数即为制备色谱柱截面积和分析色谱柱截面积之比[20]。色谱柱的选择要根据样品的性质，对疏水性样品可以选择反相色谱柱，亲水性样品可选正相色谱柱和亲水色谱柱，生物大分子可选择离子交换色谱柱，碳水化合物可用疏水作...
